- Trang Chủ
- Vật lý
- Giáo trình hướng dẫn phân tích sự rối loạn của cơ năng thần kinh thực vật dưới sự điều tiết của trung khu thần kinh trung ương p4
Xem mẫu
- h a n g e Vi h a n g e Vi
XC XC
e e
F- F-
w w
PD
PD
er
er
!
!
W
W
O
O
N
N
y
y
bu
bu
to
to
k
k
lic
lic
C
C
w
w
m
m
w w
w
w
o
o
.c .c
.d o .d o
c u -tr a c k c u -tr a c k
4. Dung d ch Phosphomolybdic
5. Dung d ch axit Benzoic bão hoà: 2,5 gr axit benzoic hoà trong 1000 ml nư c c t.
6. Dung d ch Glucoz chu n g c (1 ml có 10 mg glucoz): ðư ng glucoz dùng pha ph i th t
khô: l y glucoz ñ sùng v i H2SO4 m t ñêm trong l kín ho c s y 80oC trong 2 gi . Cân
th t chính xác 1,000gr glucoz cho vào bình ñ nh m c100 ml, r i cho axit benzoic bão hoà
cho ñ n m c 100.
7. Dung d ch glucoz dùng ( 1 ml có 0,1 mg glucoz): L y 1 ml dung d ch trên pha thành 100
ml v i axit benzoic bão hoà.
+ Thao tác:
L y c c 50 ml cho vào: 7 ph n nư c t
1 ph n máu (có ch t kháng ñông)
1 ph n Natri tungsta 10%
1 ph n axit sunfuric 2/3N
Cho t t , v a cho v a l c. Sau 5 phút dung d ch chuy n sang màu nâu b m, k t t a, l c
không n i b t.
L c qua gi y l c ho c ly tâm ñ lo i protit l ng xu ng dư i. Nư c máu trong này có th dùng
ñ ñ nh lư ng creatinin, ñ m c n, …
Các bư c ti p theo:
Các ng (ml)
Các bư c
ng ng xét
ng chu n
tr ng nghi m
Dung d ch glucoz ch a 0,1mg/ml 0 1,0 0
Nư c máu 0 0 1,0
Nư c c t 3,0 2,0 2,0
Dung d ch ki m ñ ng 1,0 1,0 1,0
Tr n ñ u và ñun cách thu sôi 8 phút( tính t lúc sôi), l y ra ñ l nh 3 phút. ð ng l c và cho
ti p:
Dung d ch Photphomolybdic 1,0 1,0 1,0
Tr n ñ u và ñ sau 2 phút cho khí CO2 b c h t
Nư c c t v a ñ 12,5 12,5 12,5
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….121
- h a n g e Vi h a n g e Vi
XC XC
e e
F- F-
w w
PD
PD
er
er
!
!
W
W
O
O
N
N
y
y
bu
bu
to
to
k
k
lic
lic
C
C
w
w
m
m
w w
w
w
o
o
.c .c
.d o .d o
c u -tr a c k c u -tr a c k
Tr n ñ u và ñưa so màu trong vòng 5 phút. Quang k ñi n, kính l c màu xanh (λ = 440µm)
ho c dùng t s c k Dubog.
Cách tính:
T s c k : mg% glucoz =[h ( ng chu n)/ h( ng xét nghi m)] x0,1x100/0,1
= h( ng chu n)/ h( ng xét nghi m) x100.
nghi m / Echu n x100.
Quang k ñi n: mg% glucoz = Exét
Có th so màu b ng m t thư ng v i 3 trư ng h p:
- N u màu c a ng xét nghi m và ng chu n b ng nhau: Lư ng ñư ng huy t= 100 mg%.
- N u ng xét nghi m s m hơn thì rút ng xét nghi m và ng chu n, m i ng 10 ml cho vào
hai ng nghi m cùng c . Pha loãng dung d ch ng xét nghi m b ng nư c c t cho ñ n lúc
màu 2 ng nghi m b ng nhau; ví d c n x ml nư c c t. Lư ng ñư ng huuy t s là:
mg% glucoza = 100x( 10 + X)/10.
- N u ng xét nghi m màu nh t hơn thì pha loãng ng chu n, lư ng nư c cho thêm là X ml
và lư ng ñư ng huy t là:
glucoza % = 100x 10/ (10 + X).
ð xét nghi m ñư c nhanh có th làm s n b ng m u.
Chú ý:
- N u ch t kháng ñông trong máu quá nhi u có th làm cho protit k t t a không h t.
Trư ng h p y cho thêm vài gi t H2SO4 10% r i l c m nh sau ñó l c.
V i huy t thanh và huy t tương lúc lo i protit lư ng axit sunfuric và axit tungstic có th
gi m m t n a và thay b ng nư c c t.
Nư c máu ñã lo i protit n u không xét nghi m ngay, có th cho thêm m t gi t toluen
vào b o qu n trong t l nh.
Dung d ch phosphomolybdic n u có màu xanh thì không dùng ñư c.
+ ý nghĩa ch n ñoán
- ðư ng huy t cao: Trúng ñ c toan, b nh chó d i, li t sau khi ñ , viêm th n, cư ng
giáp tr ng, cư ng thư ng th n, thi u insulin.
- ðư ng huy t th p: Do ñói, ti t s a nhi u, làm vi c n ng; Trúng ñ c, viêm gan, thi u
máu, viêm th n mãn, như c năng giáp tr ng, xêtôn huy t bò,….
b. Phương pháp Nelson Somogyi
- Nguyên t c: Oxy hoá ñư ng b ng thu c th ki m ñ ng có dư natrisunfat ñ tránh s
oxy hoá tr l i c a oxy ñ ng ñư c t o thành.
Sau ñó ñ nh lư ng so màu ph c ch t màu xanh t o thành do thu c th asen- molypdic
tác d ng v i oxy ñ ng.
c. Dùng máy ñ nh lư ng ñư ng huy t (Blood Glucose Meter)
Các bư c ti n hành
Bư c 1: Ch nh code c a máy ñúng code c a gi y th
- B t nút on/off ñ m máy: khi máy m thì màn hình c a máy s nh p nháy, sau m t
kho ng th i gian màn hình s xu t hi n code c a máy.
- Ch nh s code c a máy: N u s code c a máy không
ñúng v i s code c a gi y th thì ph i ti n hành ñi u ch nh máy:
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….122
- h a n g e Vi h a n g e Vi
XC XC
e e
F- F-
w w
PD
PD
er
er
!
!
W
W
O
O
N
N
y
y
bu
bu
to
to
k
k
lic
lic
C
C
w
w
m
m
w w
w
w
o
o
.c .c
.d o .d o
c u -tr a c k c u -tr a c k
n nút C ho c M ñ tăng hay gi m s code c a máy cho b ng s code c a gi y th .
Bư c 2: Cho gi y th vào máy (chi u mũi tên c a gi y th hư ng v phía trên c a
máy - ñưa gi y th vào rãnh gi a c a máy)
Bư c 3: Cho máy c n xét nghi m vào gi y th
Máy ñ nh lư ng ñư ng huy t
+ Sau khi cho gi y th vào máy, ñ i cho t i khi trên
màn hình c a máy xu t hi n gi t máu thì cho máu vào gi y
th (vào l tròn c a gi y th )
+ Sau khi cho máu vào gi y th , ñ i m t kho ng th i gian trên màn hình c a máy s
xu t hi n hàm lư ng ñư ng huy t (mmol/l)
Chú ý: Ch cho máu v a ñ l tròn c a gi y th (không ít quá và không nhi u quá)
4. Bilirubin (s c t m t ) trong máu
Lư ng bilirubin trong máu r t ít, nh t là bilirubin k t h p ( cholebilirubin )
Ba trư ng h p sau ñây bilirubin tích l i nhi u trong máu gây h i ch ng hoàng ñ n:
- Nh ng b nh làm t c ng d n m t (s i m t, giun sán chui ng m t, viêm ng d n
m t.), bilirubin k t h p không ra ñư c tá tràng, tích l i trong máu.
- Nhu mô gan t n thương (do viêm, xơ,…), bilirubin t do tăng ( Hemobilirubin ) và
bilirubin k t h p tăng trong máu
- Nh ng b nh gây toan huy t (do kí sinh trùng ñư ng máu, do trúng ñ c), h ng huy t
c u v nhi u, bilirubin t do tăng nhi u trong máu.
* Các ph n ng tìm bilirubin trong máu (huy t thanh huy t tương)
T t c các ph n ng tìm bilirubin trong huy t thanh ( huy t tương) ñ u d a trên
nguyên t c:
Bilirubin + dung d ch diazo = azobilirubin có màu h ng. N u bilirubin t do thì ph i
ñư c hoà tan trong dung môi h u cơ ( thư ng dùng c n 90 o, dung d ch cafein, ure benzoat
Natri.)
a. Phương pháp ñ nh tính:
* Ph n ng Vandenben (Van den Bergh)
M c ñích: - Nh m xác ñ nh trong huy t thanh có bilirubin k t h p tăng hay bilirubin
t do tăng.
- Trong ch n ñoán còn dùng phân bi t các trư ng h p hoàng ñ n.
Ngày nay, xét nghi m bilirubin trong huy t thanh thư ng ñư c ñ nh lư ng, ph n ng
Vandenbergh ít ñư c s d ng.
Hoá ch t:
1. Dung d ch Ehrlich:
Axit sulfanilic: 1,0 g
Ehrlich I
HCl ( d = 1,19): 15,0 ml
Nư c c t v a ñ : 1000 ml
Natri Nitris ( NaNO2): 0,5 g
Ehrlich II
Nư c c t ñ n: 100 ml
Dung d ch Ehrlich I dùng ñư c lâu dài, dung d ch Ehrlich II ch có tác d ng trong
vòng 6 tu n.
Khi dùng, l y 10 ml dung d ch Ehrlich I tr n v i 0,3 ml dung d ch Ehrlich II s ñư c
dung d ch diazon dùng trong ph n ng.
2. C n 95 o
Thao tác
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….123
- h a n g e Vi h a n g e Vi
XC XC
e e
F- F-
w w
PD
PD
er
er
!
!
W
W
O
O
N
N
y
y
bu
bu
to
to
k
k
lic
lic
C
C
w
w
m
m
w w
w
w
o
o
.c .c
.d o .d o
c u -tr a c k c u -tr a c k
Cho 1ml huy t thanh tươi (huy t tương) vào m t ng nghi m nh , r i theo thành ng gi t t
0,5 ml dung d ch diazo lên trên huy t thanh.
- N u ch ti p xúc xu t h ên ngay màu h ng tím là ph n ng tr c ti p dương tính.
- N u sau 15 phút ph n ng m i xu t hi n: ph n ng tr c ti p ch m – còn g i là ph n
ng lư ng tính.
- Sau 15 phút không xu t h ên màu h ng tím: ph n ng tr c ti p âm tính (-). Cho thêm
5 ml c n, ngoáy ñ u. N u màu h ng tím xu t hi n: Ph n ng gián ti p dương tính.
ý nghĩa ch n ñoán
* V i gia súc kho
+ Ph n ng tr c ti p âm tính (-).
+ Ph n ng gián ti p tuỳ lo i gia súc: v i huy t thanh bò kho , ph n ng gián ti p
không rõ; v i ng a, ph n ng di n ra r t rõ, vòng h ng tím khá ñ m.
* Trư ng h p b nh lý
+ Ph n ng tr c ti p dương tính: Nh ng b nh gây t c ng m t.
+ Ph n ng tr c ti p âm tính, ph n ng gián ti p rõ: Nh ng b nh làm h ng huy t c u
v nhi u
+ Ph n ng tr c ti p ch m: Nh ng b nh gây t n thương nhu mô gan.
b. Phương pháp ñ nh lư ng bilirubin trong huy t thanh (huy t tương)
Có nhi u phương pháp. Nhưng phương pháp thư ng dùng trong thú y là Bôcantruc và
Rappaport
* ð nh lư ng bilirubin theo Bôcantruc
Hoá ch t
Axit sulfanilic: 1,0g
Ehrlich I
HCl ( d = 1,19): 10,0 ml
Nư c c t: 200 ml
Nitris Natri (NaN02): 0,5 %
Ehrlich II
Nư c c t ñ n: 100 ml
Khi dùng l y 10 ml dung d ch Ehrlich I tr n v i 0,3 ml dung d ch Ehrlich II.
Thao tác
L y 6 ng nghi m nh ñ u nhau, ñánh s t 1 ñ n 6. T ng s 2, cho vào m i ng 0,5
ml nư c mu i sinh lý. Sau ñó, cho vào ng 1 và 2, m i ng 0,5 ml huy t thanh (ho c huy t
tương). Tr n ñ u huy t thanh v i nư c mu i trong ng th 2. Hút 0,5 ml trong ng th 2 cho
qua ng th 3. Tr n ñ u ng th 3, hút 0,3 ml cho qua ng th 4. C như v y cho ñ n ng
cu i cùng hút b ñi 0,5 ml.
Như v y các ng ñã ñư c pha loãng theo th t :
1 2 3 4 5 6
ng
1 2 4 8 16 32
ð pha loãng
Cho vào m i ng 0,5 ml dung d ch diazo, tr n ñ u, N u có ng xu t hi n màu h ng là
ph n ng tr c ti p.
Sau 15 phút, cho vào m i ng nghi m 0,5 ml c n, ng xu t hi n màu h ng có ñ pha
loãng l n hơn. ðó là do có ph n ng gián ti p,
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….124
- h a n g e Vi h a n g e Vi
XC XC
e e
F- F-
w w
PD
PD
er
er
!
!
W
W
O
O
N
N
y
y
bu
bu
to
to
k
k
lic
lic
C
C
w
w
m
m
w w
w
w
o
o
.c .c
.d o .d o
c u -tr a c k c u -tr a c k
Cách tính:
L y ñ pha loãng c a ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên nhân v i 0,0016 ( t c là s
bilirubin trong 1 ml dung d ch ñ ñ có ph n ng v i diazo) nhân v i 100 = s mg %
bilirubin.
Ví d : ng th 2 xu t hi n màu h ng ñ u tiên thì: 0,0016 x 2 x 100 = 3,2 mg %
bilirubin .
Chú ý:
+ ðánh d u ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên khi chưa cho c n ñ tính lư ng bilirubin
tr c ti p (cholebilirubin) và ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên sau khi ñã cho thêm c n ñ tính
lư ng bilirubin t ng s . Lư ng bilirubin gián ti p (Hemobilirubin) là hi u s c a lư ng
bilirubin t ng s và lư ng bilirubin tr c ti p.
+ ð nh lư ng theo phương pháp Bôcantruc, hàm lư ng bilirubin trong huy t thanh có
th tăng ñ n 3,2 mg%; ng a: 6,4 mg %.
ý nghĩa ch n ñoán: Trong các b nh: thuỳ ph viêm, lư ng bilirubin trong huy t
thanh tăng lên 4 mg%. Các b nh huy t bào t trùng, trúng ñ c SO2, viêm não tu truy n
nhi m – bilirubin tăng.
* ð nh lư ng bilirubin trong huy t thanh theo Rappaport
B nh ph m: huy t thanh, huy t tương
Hoá ch t:
1. dung d ch Natri benzoat – urê:
Natri benzoat: 10g
Natri urê: 10g
Nư c c t v a ñ : 100 ml
Ngoáy cho tan, l c l y nư c trong.
2. Dung d ch diazo ( như trong ph n ng Vandenbe)
3. Dung d ch HCl 1,5%
4.Dung d ch bilirubin chu n: L y 4,32 g coban sunfat khan ho c 7,8 g Coban sunfat k t
tinh ( CoSO4. 7 H2O), cho thêm m t ít nư c c t trong bình ñ nh m c 100ml. Thêm vào 1ml
H2SO4 ñ c ( C.P) r i cho nư c c t ñ n 100 ml. dung d ch có màu tương ñương 0,01 mg
bilirubin trong 1 ml.
Thao tác
+ ð nh lư ng bilirubin tr c ti p (cholebilirubin)
L y 2 ng nghi m A, B – ng A làm ng tr ng, ng B làm ng th .
ng A cho vào 0,5 ml huy t thanh, 0,25 ml HCl 1,5% r i thêm nư c c t v a ñ 5 ml.
ng B – 0,5 ml huy t thanh ; 0,25 ml dung d ch diazo r i thêm nư c c t v a ñư 5 ml.
+ ð nh lư ng bilirubin t ng s :
ng C ( ng tr ng): 0,5 ml huy t thanh; 0,25 ml dung d ch diazo r i cho thêm dung
d ch Natri benzoat – urê v a ñ 5 ml.
So màu trên quang k , kính l c màu l c ( bư c sóng landa = 500 – 540 micro met)
Tính:
E ng th
mg % bilirubin =
E ng chu n
E: m t ñ quang h c
5. Protein huy t thanh
Vi c xác ñ nh Protein t ng s và các ti u ph n c a nó trong huy t thanh có nhi u ý nghĩa
trong ch n ñoán b nh, ñ c b êt là ch n ñoán r i lo n ch c năng gan.
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….125
nguon tai.lieu . vn
