Xem mẫu

  1. Đồ án tốt nghiệp BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP XANH NANO BẠC TRONG GEL NHA ĐAM VÀ KẾT HỢP VỚI CHITOSAN ỨNG DỤNG TRONG TẠO MÀNG CHỮA VẾT THƯƠNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS. Nguyễn Thái Ngọc Uyên ThS. Trần Thị Ngọc Mai Sinh viên thực hiện : Nguyễn Phước Sinh MSSV: 1311101032 Lớp: 13DSH02 TP. Hồ Chí iMinh, 2017
  2. Đồ án tốt nghiệp BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP XANH NANO BẠC TRONG GEL NHA ĐAM VÀ KẾT HỢP VỚI CHITOSAN ỨNG DỤNG TRONG TẠO MÀNG CHỮA VẾT THƯƠNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS. Nguyễn Thái Ngọc Uyên ThS. Trần Thị Ngọc Mai Sinh viên thực hiện : Nguyễn Phước Sinh MSSV: 1311101032 Lớp: 13DSH02 TP. Hồ Chí iiMinh, 2017
  3. Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan đây là đề tài nghiên cứu mà em trực tiếp thực hiện dưới sự hướng dẫn của TS. Nguyễn Thái Ngọc Uyên và ThS. Trần Thị Ngọc Mai. Tất cả các số liệu, kết quả trình bày trong đồ án tốt nghiệp hoàn toàn trung thực, khách quan và không sao chép số liệu của bất kỳ công trình nghiên cứu nào. Em xin chịu trách nhiệm về lời cam đoan này. TP. HCM, ngày 26 tháng 07 năm 2017 Sinh viên thực hiện (Đã Ký) Nguyễn Phước Sinh iii
  4. Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đồ án tốt nghiệp này, em xin chân thành cảm n an giám hiệu trường Đại học Công Nghệ Tp. Hồ Chí Minh cùng các thầy cô khoa Công Nghệ Sinh Học –Thực phẩm – Môi trường của trường Đại học Công Nghệ Tp. Hồ Chí Minh và khoa Vật liệu polymer và Composite của trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên Tp. Hồ Chí Minh đã tận tình chỉ dạy, giúp đỡ truyền đạt cho em những kiến thức quý giá trong suốt uá trình nghiên cứu vừa qua. Đặc biệt, em xin gửi lời cám n chân thành đến cô Nguyễn Thái Ngọc Uyên và cô Trần Thị Ngọc Mai người đã tận tình hướng dẫn và hết lòng giúp đỡ cho em trong suốt quá trình thực hiện đồ án. Em xin cám n gia đình và bạn bè luôn ở bên cạnh, là nguồn cổ vũ động viên tinh thần to lớn trong suốt quá trình học tập và thực hiện đồ án tốt nghiệp. Mặc dù đã cố gắng nhiều trong quá trình thực hiện đồ án khó tránh khỏi những sai sót, rất mong quý thầy cô và các bạn xem xét và góp ý để em có thể rút ra những kinh nghiệm quý báu cho quá trình công tác và học tập sau này. Xin chân thành cảm ơn! TP. HCM, ngày 26 tháng 07 năm 2017 Sinh viên thực hiện (Đã Ký) Nguyễn Phước Sinh iv
  5. Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC MỤC LỤC ........................................................................................................................i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ............................................................................... v DANH MỤC CÁC BẢNG ............................................................................................ vi DANH MỤC CÁC ĐỒ THỊ ........................................................................................vii DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ ........................................................................................ viii DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH ...................................................................................ix MỞ ĐẦU ......................................................................................................................... 1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ NGHIÊN CỨU ........................................................ 6 1.1. Màng sinh học chữa vết thương ......................................................................... 6 1.1.1. Định nghĩa ...................................................................................................... 6 1.1.2. Tính chất ......................................................................................................... 6 1.2. Tổng quan về chitosan ......................................................................................... 6 1.2.1. Định nghĩa ...................................................................................................... 6 1.2.2. Cấu trúc của chitosan .................................................................................... 7 1.2.3. Các tính chất của chitosan ............................................................................. 7 1.2.4. Ứng dụng của chitosan ................................................................................ 10 1.3. Hạt nano bạc ...................................................................................................... 13 1.3.1. Giới thiệu về nano bạc ................................................................................. 13 1.3.2. Đặc tính kháng khuẩn của bạc .................................................................... 14 1.3.3. Phương pháp tổng hợp Ag-NP .................................................................... 16 1.3.4. Độc tính ......................................................................................................... 18 i
  6. Đồ án tốt nghiệp 1.3.5. Ứng dụng của nano bạc ............................................................................... 20 1.4. Giới thiệu cây nha đam ..................................................................................... 21 1.4.1. Phân loại ....................................................................................................... 21 1.4.2. Thành phần hóa học .................................................................................... 22 1.4.3. Ứng dụng ...................................................................................................... 25 1.4.4. Độc tính ......................................................................................................... 26 1.4.5. Tổng hợp Ag-NP từ lá nha đam .................................................................. 26 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THỰC HIỆN ............................... 28 2.1. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu .................................................................... 28 2.2. Thiết bị, vật liệu và hóa chất ............................................................................. 28 2.2.1. Thiết bị .......................................................................................................... 28 2.2.2. Vật liệu .......................................................................................................... 28 2.2.3. Hóa chất ........................................................................................................ 28 2.3. Quy trình thực hiện ........................................................................................... 29 2.3.1. Qui trình........................................................................................................ 29 2.3.2. Thuyết minh quy trình.................................................................................. 31 2.4. Bố trí thí nghiệm ................................................................................................ 33 2.4.1. Sơ đồ bố trí thí nghiệm ................................................................................. 33 2.4.2. Khảo sát ảnh hưởng của thời gian đun lên sự tạo thành dịch Ag-NP ...... 34 2.4.3. Khảo ảnh hưởng của nhiệt độ đun lên sự hình thành Ag-NP ................... 35 2.4.4. Khảo sát ảnh hưởng của thời gian khuấy lên sự hình thành Ag-NP ........ 35 ii
  7. Đồ án tốt nghiệp 2.4.5. Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ dịch chiết nha đam-AgNO3 lên sự hình thành Ag-NP ........................................................................................................... 35 2.4.6. Phương pháp phân tích Ag-NP được tạo thành ......................................... 36 2.4.7. Tạo màng bán thấm CS-Ag-NP ................................................................... 37 2.4.8. Khảo sát tính chất của màng bán thấm CS-Ag-NP .................................... 38 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN ................................................................ 40 3.1. Tổng hợp Ag-NP ............................................................................................. 40 3.1.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng của thời gian đun lên sự tạo thành Ag-NP. ..................................................................................................................... 40 3.1.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng của nhiệt đun lên sự tổng hợp Ag- NP ............................................................................................................................ 41 3.1.3. Thí nghiệm 3 : Khảo sát thời gian khuấy lên sự tổng hợp Ag-NP ............ 42 3.1.4. Thí nghiệm 4: Khảo tỷ lệ dịch chiết nha đam kết hợp với dung dịch AgNO3 lên sự tổng hợp Ag-NP. .......................................................................................... 44 3.1.5. Kết quả chụp EDX xác định sự có mặt của Ag-NP trong mẫu .................. 46 3.1.6. Kết quả chụp TEM ....................................................................................... 47 3.2. Tạo màng bán thấm CS-Ag-NP..................................................................... 48 3.3. Khảo sát các tính chất của màng CS-Ag-NP................................................ 49 3.3.1. Kết quả khảo sát khả năng kháng khuẩn của màng bán thấm CS-Ag- NP ............................................................................................................................ 49 3.3.2. Khảo sát khả năng hấp thu dung dịch đệm phosphate .............................. 51 3.3.3. Khảo sát tốc độ truyền hơi nước .................................................................. 52 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ.............................................................. 54 iii
  8. Đồ án tốt nghiệp 4.1. KẾT LUẬN ......................................................................................................... 54 4.2. KIẾN NGHỊ: ...................................................................................................... 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO ........................................................................................... 56 iv
  9. Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT KÍ TỰ TIẾNG ANH TIẾNG VIỆT Ag-NP Silver nanoparticle Nano bạc CS Chitosan Chitosan CS-Ag-NP Chitosan silver nanoparticle Chitosan nano bạc CS-TPP Chitosan-tripolyphosphat DNA Deoxyribonucleicacid FDA Food and Drug Administration MBC Minimum bactericidal concentration NA Nutrient Agar NB Nutrient Broth PVP Polyvinyl pyrolidone RNA Ribonucleic acid SIAA Strategic Insurance Agency Alliance TEM Transmission electron microscopy TiO2-NPs Titanium dioxide nanoparticles Nano Titanium oxit TPP Tripolyphosphat United States Food and Drug USFDA Administration UV-VIS UV–visible XRD X-ray diffraction ZnO-NPs Zinc oxide nanoparticles Nano kẽm oxit v
  10. Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Số nguyên tử bạc trong một hạt Ag-NP ................................................... 14 Bảng 1.2: Thành phần cacbohydrat của nha đam .................................................... 22 Bảng 2.1: Các thiếc bị sử dụng. ................................................................................... 28 Bảng 2.2: Các hóa chất sử dụng. ................................................................................. 29 Bảng 3.1: Kết quả chụp EDX mẫu Ag-NP. ................................................................ 46 Bảng 3.2: Kết quả kháng khuẩn của màng CS-Ag-NP............................................. 50 Bảng 3.3: Độ hấp thu dung dịch đệm pH = 7.4 của màng CS-Ag-NP. .................... 51 Bảng 3.4: Khảo sát tốc độ truyền hơi nước của màng CS-Ag-NP. .......................... 52 vi
  11. Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC ĐỒ THỊ Đồ thị 3.1: Ảnh hưởng của thời gian đun lên sự tạo thành dịch chiết nha đam. ... 40 Đồ thị 3.2: Ảnh hưởng của nhiệt độ đun lên sự hình thành Ag-NP. ....................... 41 Đồ thị 3.3: Ảnh hưởng của thời gian khuấy lên sự tổng hợp Ag-NP....................... 43 Đồ thị 3.4: Ảnh hưởng tỷ lệ dịch chiết nha đam-AgNO3 lên sự hình thành Ag- NP................................................................................................................................... 44 Đồ thị 3.5: Tỷ lệ 0-1( 0 nha đam – 1 bạc). .................................................................. 44 Đồ thị 3.6: Tỷ lệ 1-0 ( 1 nha đam-0 bạc). .................................................................... 45 Đồ thị 3.7: Mật độ phân bố của hạt Ag-NP trong dung dịch. .................................. 48 Đồ thị 3.8: Độ hấp thu dung dịch điệm trung bình của màng CS-Ag-NP. ............. 51 Đồ thị 3.9: Tốc độ truyền hơi nước trung bình của màng CS-Ag-NP..................... 53 vii
  12. Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1: Qui trình tiến hành thí nghiệm ................................................................ 30 Sơ đồ 2.2: Qui trình khảo sát các tính chất của CS-Ag-NP .................................... 33 Sơ đồ 2.3: Sơ đồ bố trí thí nghiệm ............................................................................. 34 viii
  13. Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1: Cấu trúc chitin và chitosan ...................................................................... 7 Hình 1.2: Công thức tổng quát của chitin và chitosan ........................................... 7 Hình 1.3: Tác động của ion bạc lên vi khuẩn ........................................................... 15 Hình 1.4: Ion bạc vô hiệu hóa enzym chuyển hóa oxy của vi khuẩn...................... 16 Hình 1.5: Ion bạc liên kết với các base của DNA ..................................................... 16 Hình 1.6: Tổng hợp xanh Ag-NP từ dịch chiết thực vật .......................................... 17 Hình 1.7: Các ứng dụng của Ag-NP .......................................................................... 20 Hình 1.8: Cây nha đam ............................................................................................... 21 Hình 3.1: Ảnh hưởng của thời gian đun lên sự hình thành Ag-NP. ....................... 41 Hình 3.2: Ảnh hưởng của nhiệt độ đun lên sự hình thành Ag-NP. ........................ 42 Hình 3.3: Ảnh hưởng của thời gian khuấy lên sự hình thành Ag-NP. ................... 43 Hình 3.4: Ảnh hưởng của tỉ lệ dịch chiết nha đam – AgNO3 lên sự hình thành Ag- NP.................................................................................................................................. 46 Hình 3.5: Kết quả chụp EDX mẫu Ag-NP. ............................................................... 46 Hình 3.6: Kết chụp TEM dịch Ag-NP. ...................................................................... 47 Hình 3.7: Tạo màng bán thấm CS-Ag-NP. ............................................................... 49 Hình 3.8: Kết quả kháng khuẩn của màng CS-Ag-NP với 7% chitosan ............... 50 ix
  14. Đồ án tốt nghiệp MỞ ĐẦU  ĐẶT VẤN ĐỀ Theo thống kê hàng năm trên thế giới, có rất nhiều trường hợp bịtai nạn, chiếm vị trí hàng đầu trong những nguyên nhân gây ra tử vong, đặc biệt là ở trẻ em. Vết thư ng thường dễ bị nhiễm khuẩn do da bị tổn thư ng, tạo điều kiện cho vi khuẩn, nấm xâm nhập và làm ức chế miễn dịch toàn thân.Vết thư ng trên c gây hậu quả khó lường, không chỉ ảnh hưởng tới sức khỏe mà cả khía cạnh thẩm mỹ của con người. Quá trình điều trị thư ng tích diễn ra thông qua một loạt các quá trình chồng chéo lên nhau như keo tụ, viêm nhiễm, tăng trưởng và tái tạo mô. Các tổn thư ng đó nếu không được chăm sóc đúng cách rất dễ bị sẹo sau khi lành hoặc bị nhiễm trùng có thể dẫn đến nguy hiểm tính mạng. Mục tiêu cuối cùng của điều trị tổn thư ng là sự phục hồi nhanh và không để lại di chứng.Vì vậy, để đạt hiệu quả cao nhất trong việc điều trị vết thư ng ta cần có loại thuốc hội đủ các tính năng như kháng khuẩn, chống viêm, liền sẹo…Do đó, việc nghiên cứu và phát triển một loại vật liệu mới có khả năng điều trị hiệu uả vết thư ng trở nên cấp thiết (Nguyễn Văn Khôi, 2007; Phạm Ngọc Lân, 2007; Nguyễn Thị Ngọc Tú, 2005). Đã có rất nhiều công trình nghiên cứu polymer sinh học trong lĩnh vực y sinh như cho hệ giải phóng thuốc, cấy ghép mô, tế bào, cấy ghép da, chất keo dán y sinh, đệm y sinh, chỉ khâu tự tiêu,... do màng polymer sinh học có ưu điểm là khi được cấy lên vết thư ng, nó có khả năng kháng khuẩn và tạo điều kiện thông thoáng trên bề mặt da giúp da tái tạo nhanh, khi phục hồi bệnh nhân sẽ không đau, không để lại sẹo (Kunal Pal và Cộng sự, 2006; Kunal Pal và Cộng sự, 2007). Để chữa bỏng và điều trị vết thư ng người ta có thể sử dụng các màng sinh học để thay thế băng gạc từpolymer phân hủy sinh học thông qua enzyme có thể như: collagen, chitin và chitosan (CS) (Cheng Ho Chen và Cộng sự, 2008). Trong đó, chitosan được biết là mộtpolymer thiên nhiên có trong vỏ giáp xác như tôm, cua, mai mực …Chúng có khả năng tư ng thích và tự phân hủy sinh học, độc tính thấp, hoạt tính sinh học cao và đa dạng bao gồm tính kháng 1
  15. Đồ án tốt nghiệp khuẩn, kháng nấm, tăng sinh tế bào, tăng cường miễn dịch của c thể nên gel chitosan đã và đang được sử dụng nhiều trong điều trị vết thư ng. Với sự phát triển của công nghệ nano và tiềm năng ứng dung của vật liệu này trong y sinh, vật liệu nano thu hút rất nhiều nghiên cứu. Trong đó, nano bạc (Ag-NP) đang là một vật liệu hấp dẫn đang được quan tâm của ngành dược hiện nay. Không chỉ có tác dụng kháng khuẩn hiệu quả mà còn sở hữu khả năng chống viêm tốt, Ag-NP được ứng dụng để phát triển các miếng dán, kem trị vết thư ng, vết bỏng, chế tạo mỹ phẩm, chất khử mùi và cả các dung dịch hỗ trợ tăng cường miễn dịch. C chế tác dụng đa dạng chính là chìa khóa cho phổ kháng khuẩn rộng và những tác dụng hiệu quả của Ag-NP (Chử Thị Thu Huyền và Cộng sự, 2014). Sự kết hợp giữa hạt nano và màng sinh học để tạo màng sinh học dạng lai cũng là một hướng chế tạo vật liệu quan trọng trong công nghệ y sinh. Trong đó, polymer sinh học dạng lai giữa chitosan và Ag-NP được nhiều nhà khoa học chú ý nghiên cứu để ứng dụng vào lĩnh vực y sinh do chúng có tính kháng khuẩn và đặc biệt là chúng có khả năng kích thích quá tình tái tạo tế bào (Alemdaroğlu Ceren và Cộng sự, 2006; Abhishek Kaler và Cộng sự, 2014). Dạng vật liệu lai này có thể được kết hợp các dạng băng gạc hoặc thuốc bôi để điều trị vết thư ng do bỏng, do tai nạn, các vết loét do tiểu đường, các vết thư ng bị nhiễm trùng,…  TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Ngày nay, khi việc kháng thuốc càng trở nên phổ biến thì việc tìm kiếm một loại vật liệu có tiềm năng thay thế kháng sinh là một trong những nhu cầu cấp thiết. Bạc được biết là kim loại có khả năng diệt khuẩn tốt, từ lâu đã được sử dụng để làm dụng cụ bảo quản thức ăn.Với sự phát triển công nghệ nano, việc điều chế và khám phá các đặc tính kháng khuẩn tuyệt vời của Ag-NP đã thu hút được sự quan tâm nghiên cứu và ứng dụng làm chất diệt khuẩn. Tuy nhiên phư ng pháp tổng hợp Ag-NP thường dùng các chất hóa học để khử ion bạc thành bạc nguyên tử, việc xử lí hóa chất sau tổng hợp gây ra nhiều tốn kém, gây ô nhiễm môi trường và sản phẩm cũng có thể còn chứa tồn 2
  16. Đồ án tốt nghiệp dư hóa chất độc hại nên phư ng pháp tổng hợp nano bạc từ các chất tự nhiên (tổng hợp xanh) có hoạt tính đang trở nên ngày càng quan trọng do tính thân thiện môi trường của phư ng pháp an toàn với sức khỏe. Bên cạnh đó, các thành phần có trong nha đam có tác dụng giúp nhanh lành vết thư ng, trị thâm, liền sẹo. Với khả năng ứng dụng rộng rãi của bạc, chitosan và nha đam, cộng với đặc tính không độc, kháng khuẩn cao, tư ng hợp với c thể nên trong công nghệ bào chế dược phẩm chúng có thể được sử dụng kết hợp để tạo vật liệu kháng khuẩn, trị vết thư ng đạt hiệu quả cao. Nên đề tài “Nghiên cứu tổng hợp xanh nano bạc trong gel nha đam và kết hợp với chitosan ứng dụng trong tạo màng chữa vết thương” được lựa chọn nghiên cứu  TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU Các nghiên cứu trước đây cho thấy khả năng ứng dụng vật liệu lai chitosan-nano bạc (CS-Ag-NP) trong điều trị vết thư ng Nguyễn Thị Mỹ Lan và cộng sự đã nghiên cứu hỗn hợp Chitosan tan trong nước- bacterial cellulose-Polyvinyl pyrolidone và có bổ sung thêm dung dịch Ag-NP nhằm tăng tính kháng khuẩn của hỗn h p. Kết quả rất tốt khi thử nghiệm trên chuột bị bỏng da. Dịch paste ở các mẫu có chứa Ag-NP ở các nồng độ 10 ppm, 20 ppm, 30 ppm có khả năng kháng được hai chủng Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus là hai chủng vi khuẩn phổ biến trên các vết bỏng. Khi bôi dịch paste lên vết bỏng có thể rút ngắn thời gian lành hóa, vùng da tổn thư ng phục hồi lại như bình thường (Nguyễn Thị Mỹ Lan và Cộng sự, 2009). Vật liệu tổ hợp Ag-NP – Curcumin – Chitosan dùng điều trị vết bỏng đạt hiệu quả cao h n so với việc để vết bỏng lành tự nhiên hoặc chỉ dùng CS; hỗn hợp CS-Ag-NP. Đặc biệt việc điều trị vết bỏng bằng vật liệu tổ hợp Ag-NP – Curcumin – Chitosan sẽ giúp vết thư ng hoàn toàn liền sẹo (Trần Thị Nguyệt, 2015). Theo kết quả nghiên cứu của Rita Singh và Durgeshwer Singh được thực hiện trên các chủng Pseudomonas aeruginosa và Staphylococcus aureus để xác định hiệu quả kháng khuẩn của màng chitin có chứa Ag-NP với các nồng độ 30, 50, 70 và 100 ppm. 3
  17. Đồ án tốt nghiệp Không có tính kháng đối với P. aeruginosa khi quan sát nghiệm thức chứa Ag-NP nồng độ 70 ppm sau 1 giờ. Mật độ tế bào S. aureus giảm sau 1 giờ và giảm 4 lần sau 6 giờ với màng chitin Ag-NP nồng độ 100 ppm. Kết quả của thí nghiệm này chứng tỏ khả năng kháng khuẩn của màng chitin chứa các hạt Ag-NP. Màng chitin với Ag-NP có nồng độ 100 ppm cho thấy hoạt tính kháng khuẩn đầy hứa hẹn chống lại các mầm bệnh thường nhiễm vào vết thư ng (Rita Singh và Durgeshwer Singh, 2014). Kết quả nghiên cứu của Y. Yousefpoor và cộng sự đã khảo sát sự hồi phục của vết trên chuột thông qua việc điều tri bằng Ag-NP trong gel nha đam cho thấy gel nha đam làm tăng tỷ lệ lành vết thư ng, trong khi các hạt Ag-NP có hiệu ứng chậm h n; Và khi chúng được phối trộn, nó cũng tư ng tự như hiệu quả trung bình của cả gel Aloe vera và các hạt Ag-NP (Y. Yousefpoor và Cộng sự, 2016).  MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU - Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng lên sự tạo thành Ag-NP. - Kết hợp Ag-NP với chitosan tạo màng bán thấm có khả năng trị vết thư ng. - Khảo sát tính chất của màng bán thấm.  NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU Nhiệm vụ tổng quát: tổng hợp xanh hạt Ag-NP từ gel nha đam và kết hợp Ag-NP với chitosan tạo màng bán thấm ứng dụng vào việc chữa vết thư ng. Nhiệm vụ cụ thể: - Tổng quan tài liệu về chitosan, nha đam, nano bạc - Xác định thời gian đun cho dịch chiết nha đam tối ưu tạo Ag-NP. - Xác định nhiệt độ đun dịch nha đam tối ưu tạo Ag-NP. - Xác định thời gian khuấy tối ưu tạo Ag-NP. - Xác định tỷ lệ dịch chiết nha đam-AgNO3. - Phối trộn Ag-NP với chitosan để tạo màng bán thấm CS-Ag-NP có khả năng chữa vết thư ng - Khảo sát một số tính chất của màng bán thấm CS-Ag-NP 4
  18. Đồ án tốt nghiệp  PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đồ án tốt nghiệp đã sử dụng các phư ng pháp nghiên cứu: - Phư ng pháp đo pH của gel nha đam bằng máy đo pH - Đo hàm lượng chất khô hòa tan bằng Brix kế. - Phư ng pháp đo UV-Vis. - Phư ng pháp đo TEM, EDX.  CÁC KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC - Lựa chọn được thời gian đun mẫu cho dịch chiết nha đam tối ưu. - Lựa chọn được nhiệt độ đun, thời gian khuấy cho kết quả tối ưu nhất tạo Ag- NP. - Lựa chọn được tỷ lệ dịch chiết và dung dịch AgNO3 cho kết quả tối ưu tạo Ag- NP. - Tạo được màng bán thấm CS-Ag-NP - Khảo sát các tính chất của màng  KẾT CẤU CỦA ĐỒ ÁN Đồ án tốt nghiệp gồm có 3 chư ng: - Chư ng 1: Tổng quan tài liệu: tổng quan các tài liệu tham khảo để thực hiện đồ án tốt nghiệp. - Chư ng 2: Vật liệu và phư ng pháp nghiên cứu: trình bày vật liệu và các phư ng pháp được dùng để nghiên cứu, kiểm tra kết quả. - Chư ng 3: Kết quả và biện luận: đưa ra các kết quả đã nghiên cứu được cùng với các biện luận, so sánh với các kết quả với nhau. - Chư ng 4: Kết luận và kiến nghị: Tóm tắt các kết quả đã đạt được và kiến nghị nghiên cứu sâu h n về kết quả 5
  19. Đồ án tốt nghiệp CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ NGHIÊN CỨU 1.1. Màng sinh học chữa vết thương 1.1.1. Định nghĩa Chữa các vết thư ng là một uá trình thúc đẩy nhanh chóng sự phục hồi da và làm nhanh sự lành vết thư ng. Màng sinh học có cấu trúc xốp được thiết kế để phủ lên và chữa vết bỏng, vết thư ng. Màng sinh học có tác dụng kiểm soát mất nước do bay h i, đảm bảo trao đổi oxy cho da hô hấp và thúc đẩy khả năng thoát chất lỏng. Ngoài ra nhờ hoạt tính kháng khuẩn tự nhiên của các loại màng sinh học nên khi phủ lên màng có tác dụng kháng khuẩn và hạn chế sự xâm nhiễm các vi sinh vật ngoại lai. Vết thư ng được bao phủ bởi màng màng sinh học được cầm máu và làm lành nhanh chóng. Thí nghiệm về mô bệnh học đã xác nhận sự tăng tỷ lệ tái tạo biểu mô cũng như tổ chức collagen dưới lớp biểu bì. Vết thư ng được chữa bằng màng sinh học sẽ có hiệu quả giảm sẹo do ức chế các sự hình thành sợi trong vết thư ng, nó có tác dụng cầm máu và hình thành lớp màng bao phủ bảo vệ vết thư ng (Kunal Pal và Cộng sự, 2006; Rita Singh và Durgeshwer Singh, 2014). 1.1.2. Tính chất (Nguyễn Hường Hảo, 2015) - Tính chất thấm nước thấm khí - Chống nhiễm khuẩn và làm khô da - Giúp da tái tạo nhanh - Phục hồi mà không gây đau cho bệnh nhân - Không để lại sẹo 1.2. Tổng quan về chitosan 1.2.1. Định nghĩa Chitin là thành phần cấu trúc nên vỏ côn trùng, tôm, cua, vách tế bào nấm. Chitin có cấu tạo tư ng tự như cellulose, nhưng có khác biệt là đ n vị cấu tạo nên chitin là N- acetyl-D-glucosamine, các đ n vị này nối với nhau bằng liên kết β-1,4-glycoside (Tưởng Ngọc Thục Uyên, 2010). 6
  20. Đồ án tốt nghiệp 1.2.2. Cấu trúc của chitosan Chitosan một polysacarit mạch thẳng, là dẫn xuất đề axetyl hoá của chitin, trong đó nhóm (–NH2) thay thế nhóm (-NHCOCH3) ở vị trí C(2). Chitosan được cấu tạo từ các mắt xích D-glucozamin liên kết với nhau bởi các liên kết β-(1-4)-glicoside, do vậy chitosan có thể gọi là poly β-(1-4)-2-amino-2-deoxi-D-gluco hoặc là poly β-(1-4)-D- glucozamin (Nguyễn Thị Thu Trang, 2016) Hình 1.1: Cấu trúc chitin và chitosan (Tưởng Ngọc Thục Uyên, 2010). Công thức tổng quát của chitin, chitosan có dạng: (C8H11NO5)n với cấu tạo như sau: Hình 1.2: Công thức tổng quát của chitin và chitosan (Nguyễn Thị Thu Trang, 2016). 1.2.3. Các tính chất của chitosan (Nguyễn Thị Thùy Trang, 2011) 1.2.3.1. Mức độ deacetyl hóa 7
nguon tai.lieu . vn