- Trang Chủ
- Khoa học tự nhiên
- Đề tài: Vai trò của sucrose và sự khác nhau của cytokinin trong ống nghiệm đối với sự phát sinh hình dạng của hoa hồng (hybrid trà) cv
Xem mẫu
- Bộ Giáo Dục Và Đào Tạo
Trường Đại Học Yersin Đà Lạt
Khoa: Công nghệ sinh học
- SINH LÝ CHỨC NĂNG THỰC VẬT
NHÓM 4
VAI TRÒ CỦA SUCROSE VÀ SỰ KHÁC NHAU
CỦA CYTOKININ TRONG ỐNG NGHIỆM ĐỐI
VỚI SỰ PHÁT SINH HÌNH DẠNG CỦA HOA
HỒNG (HYBRID TRÀ) CV.
GVHD: PGS.TS. Dương Tấn Nhựt
Thạc sĩ. Nguyễn Thanh Hải
- Các thành viên của nhóm
Võ Thị Kim Hiền Kiều Quốc Long Hoàng
Phạm Kim Ngọc Hiệp Trần Văn Hoàng
Nguyễn Văn Hiếu Trần Thị Huyền
Bùi Thị Hoa Quế Thị Mai Hương
Hòang Thị Hồng Hoa Nguyễn Thị Hường
Ngô Thị Thùy Hoa Quách Trần Bạch Lan
Trịnh Thị Hòa
- Mục lục:
I. Giới thiệu
II. Vật liệu và phương pháp
III. Kết luận
IV. Tài liệu tham khảo
- I. Giới thiệu:
Hoa là một cơ chế phức tạp, nhạy cảm với môi
trường, có ý nghĩa trong khoa học phát triển và sinh lý
học và là một trong những nền tảng cơ bản nhất của
nông nghiệp. Khả năng nuôi cấy để tạo thành hoa
trong ống nghiệm phụ thuộc vào rất nhiều yếu tố, nội
bộ và bên ngoài, hóa học và vật lý, và hầu như tất cả
đều tương tác bằng nhiều cách phức tạp và không
thể đoán trước
Hoa hồng đáng yêu với màu sắc khác nhau, hình
dáng đẹp và mùi hấp dẫn đã được yêu thích nhất hoa
trang trí cho một thời gian dài. Ngày nay, chúng được
trồng trên toàn thế giới như hoa cắt, trồng cây trong
chậu và trang trí cho khu vườn.
- Trong sự phát sinh hình dạng của hoa hồng
thì sucrose và cytokinin đóng vai trò quan
trọng. cytokinin có tác dụng kích thích về hoa
cảm ứng,ngược lại nó ức chế có hoa, nhưng
kích thích tăng trưởng sinh dưỡng. Về cơ
bản, sucrose được biết đến là nguồn cacbon
của sự lựa chọn cho nền văn hóa trong các
nghiên cứu in vitro hoa.
- Trong bài báo này, khả năng ra hoa in vitro
của hoa hồng (hybrid trà) cv. cành hoa được
nghiên cứu bằng cách điều chỉnh một số yếu
tố ảnh hưởng đến hoa như nồng độ sucrose,
điều hòa sinh trưởng thực vật (PGR), vĩ mô
và vi mô vô cơ và hữu cơ các yếu tố trong
MS (Murashige và Skoog, 1962) trung bình.
- II.Vật liệu và phương pháp:
1. Vật Liệu :
Cành hoa hồng (hybrid trà) khỏe mạnh trong giai
đoạn trước khi nở chứa khoảng 8-9 chồi xanh không
hoạt động được thu từ khu vườn hoa hồng ở Đà Lạt
Môi trường nuôi cấy là môi trường MS (Murashige và
Skoog, 1962) có bổ sung nước dừa 10%, adenine
sulphate 40mg/L, saccharose 20g/L, maltose 10 g/L,
agar 9g/L, than hoạt tính 3g/L. Môi trường được bổ
sung các chất điều hòa sinh trưởng thực vật là 6-
benzyladenine (BA), kinetin (KN) và naphthalene
-1acetic acid (NAA) ở các nồng độ khác nhau.
- 2.Các bước tiến hành:
Nuôi cấy mô tế bào cây hoa hồng trà bằng cách tái
sinh chồi trực tiếp từ mẫu mô được thu từ khu vườn
hoa hồng ở Đà Lạt .
Vật liệu nuôi cấy: Chủ yếu là những khối mô và cơ
quan tách rời: mô phân sinh, đỉnh sinh trưởng,
Các bước tiến hành:
+ Lựa chọn vật liệu
+ Khử trùng vật liệu nuôi cấy
+ Cấy vào môi trường mẫu
+ Nhân nhanh chồi
+ Chuyển sang môi trường tạo rễ,tạo cây hoàn chỉnh.
- Bước 1: Lựa chọn vật liệu
Chọn những cành cây khỏe mạnh gồm 8-9 chồi
xanh không hoạt động.
Bước 2: Khử trùng vật liệu nuôi cấy
Tất cả tiết điêm đã được tẩy rửa trong buồng
̉
vô trùng và đặt dưới nước sinh hoạt trong vòng
40 phút, sau đó khử trùng bằng HgCl2 0,1%
trong 10 phút, rồi xả lại bốn lần với nước cất.
Cuối cùng, bắn một ít mô ngoại vi vào chồi
không hoạt động ( đường kính khoảng 0.5cm)
đã được vô trùng ngăn cách với tiết điêm phần
̉
và đặt trên các môi trường nuôi cấy ban đầu.
- Bước 3: Cấy vào môi trường mẫu
MS được sử dụng như là môi trường nuôi cấy
cơ bản. Tất cả môi trường nuôi cấy đã được điều
chỉnh để pH 5,8 với KOH 1N hoặc HCl 1N trước
khi khử trùng tại 121oC, 1 atm trong vòng 40 phút.
Phytohormones đã được thêm vào trước khi khử
trùng.
Sự nuôi cấy được duy trì dưới nhiệt độ mát
khoảng 25 ± 20C, dưới ánh sáng huỳnh quang,
cung cấp một mật độ thông lượng lượng tử của
45µmol m–2 s–1.
- Bước 4:Nhân nhanh chồi
Chồi thu được sau
khoảng 45 ngày kể từ
ngày được cắt , tách
chồi và được cấy trên
môi trường bổ sung
3,0 mg l-1 BA và 0,05
mg l-1 NAA. Cấy
truyền được thực hiện
60 ngày trên cùng một
môi trường. Nhân chồi cây hoa
hồng trong bình
serum 500 ml.
- Bước 5: Chuyển sang môi trường tạo
rễ,tạo cây hoàn chỉnh
- Khi cây đạt tiêu chuẩn
về chiều cao, số lá thì
chuyển sang MT tạo rễ.
Đó là MT dinh dưỡng thích
hợp bổ sung chất KT
auxin, IBA.
- Chuyển cây sang MT
thích ứng gần giống với
MT tự nhiên về: nhiệt độ,
độ ẩm, ánh sáng...
- 3. Vai trò sucrose và cytokinin
trong thí nghiệm in vitro:
• a. Sucrose: (đường)
- Vai trò quan trọng của sucrose đã được
quan sát thấy trong sự thích ứng ở nhiều loài.
Đường đã được xem là nguồn cacbon cần
thiết trong môi trường nuôi cấy và sự phát
triển của hoa (Scorza, 1982). Jumin và Nito
(1996) quy định rằng việc bổ sung các
sucrose 3-7% vào môi trường là cần thiết cho
sự thích ứng của hoa Fortunella hindsii.
- - Sự hình thành của hoa Pisum sativum L. chỉ
được quan sát thấy khi sucrose tập trung
được ở 30-60 g ml-1 (Franklin et al., 2000).
- Vai trò của sucrose trên sự phát sinh hình
dạng của hoa
Ảnh hưởng của sucrose trên các cành
mang nụ hoa được ghi nhận sau 3 tháng
nuôi
Nồng độ đường sucrose Chồi hoa (%)
(g l–1)
15 0
30 20.0bz
45 33.3a
Vai trò của sucrose trong sự phát sinh hình dạng
của hoa sau 2 tháng nuôi.
- Bảng 1 Cho thấy phần
trăm của sự hình thành
chồi hoa có xu hướng tăng
khi nồng độ sucrose tăng
lên, nhưng không có nụ
hoa trong môi trường cấy
truyền vừa có chứa 15 g l-
1 sucrose.
Các chồi hoa được hình
thành trong thử nghiệm
này không thể phát triển
hơn nữa, tất cả chúng sẽ
héo khi đường kính của nó
đạt 1-2 mm (Hình 1a).
- -Vai trò chính của sucrose được ghi lại trong thí
nghiệm, nơi mà số chồi hoa được tỷ lệ thuận với
nồng độ sucrose. Tại 15 g l-1 sucrose, sự thích ứng
của hoa bị ức chế . Chúng ta có thể kết luận rằng
nồng độ giới hạn sucrose ảnh hưởng lên sự thích
ứng của hoa.
- Hơn nữa, quan sát thấy nụ hoa bị héo khi chúng
đạt được đường kính từ 1-2 mm. Điều này cho thấy
rằng sucrose là một yếu tố cần thiết trong sự thích
ứng của nụ hoa hoặc phát triển ban đầu, khác yếu
tố (s) là bắt buộc để giúp chúng phát triển đầy đủ
trong giai đoạn sinh trưởng và phát triển của hoa
trong ống nghiệm.
nguon tai.lieu . vn