- Trang Chủ
- Lâm nghiệp
- Bài giảng giống cây rừng : Nhân giống bằng phương pháp nuôi cấy mô và tế bào part 2
Xem mẫu
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
5.3. T¸i sinh chåi.
- Môc ®Ých: kÝch thÝch mÉu cÊy h×nh thµnh chåi
®Ó lµm vËt liÖu nh©n nhanh.
- Ph¬ng ph¸p: CÊy chuyÓn mÉu cÊy sang b×nh
cã chøa m«i trêng ho¸ häc míi víi thµnh
phÇn chÊt ®iÒu hoµ sinh trëng kÝch thÝch t¹o
chåi.
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
5.4. Nh©n nhanh.
- Môc ®Ých: t¨ng sè lîng chåi trong giai ®o¹n nu«i
cÊy (tõ 1 thµnh v¹n chåi, triÖu chåi). §©y lµ giai
®o¹n quan träng nhÊt trong nh©n gièng in vitro.
- Ph¬ng ph¸p: cÊy chuyÓn chåi sang c¸c b×nh cã
chøa m«i trêng ho¸ häc víi thµnh phÇn chÊt ®iÒu
hoµ sinh trëng kÝch thÝch t¹o chåi nhiÒu lÇn (tõ
chåi thµnh nhiÒu chåi/1 b×nh); 1 b×nh thµnh nhiÒu
b×nh,...
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
5.5. T¹o rÔ cho c©y. (t¹o c©y hoµn chØnh)
- Môc ®Ých: tõ mçi chåi t¹o thµnh 1 c©y con hoµn
chØnh gåm ®Çy ®ñ th©n, rÔ vµ l¸.
- Ph¬ng ph¸p: cÊy chuyÓn c¸c chåi sau giai ®o¹n
nh©n nhanh sang c¸c b×nh cã chøa m«i trêng ho¸
häc cã thµnh phÇn chÊt ®iÒu hoµ sinh trëng kÝch
thÝch t¹o rÔ. TÊt c¶ c¸c lÇn cÊy chuyÓn ®Ó t¸i sinh
chåi, nh©n nhanh vµ t¹o rÔ ®Òu ph¶i ®îc thùc hiÖn
trong buång cÊy v« trïng.
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
5.6. HuÊn luyÖn c©y m«.
- Môc ®Ých: lµm cho c©y m« quªn dÇn víi ®iÒu kiÖn tù
nhiªn (nhiÖt ®é, ¸nh s¸ng vµ t×nh tr¹ng nhiÔm bÖnh).
- Ph¬ng ph¸p:
+ §a dÇn c¸c b×nh cÊy c©y hoµn chØnh tõ trong
phßng nu«i (cã ®iÒu kiÖn vËt lý thÝch hîp) ra khu
huÊn luyÖn (cã ®iÒu kiÖn vËt lý hoµn toµn tù nhiªn).
+ Më dÇn n¾p b×nh ®Ó cho c©y thÝch nghi dÉn víi
®iÒu kiÖn tù nhiªn.
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
5.7. CÊy c©y vµo bÇu ®Êt vµ ch¨m sãc c©y ë vên ¬m.
- Môc ®Ých: t¹o c©y con ®Ó ®a vµo s¶n xuÊt.
- Ph¬ng ph¸p:
+ LÊy c©y ra khái b×nh nu«i cÊy, röa s¹ch m«i trêng
ho¸ häc b¸m vµo rÔ c©y.
+ CÊy c©y vµo bÇu ®Êt gièng nh cÊy c©y con tõ h¹t
hoÆc gi©m hom.
+ Ch¨m sãc c©y: gièng ch¨m sãc c©y hom.
- 5. Qui tr×nh nh©n gièng b»ng ph¬ng ph¸p
nu«i cÊy m« - tÕ bµo.
C©y mÑ LÊy mÉu G§ chuÈn bÞ (T¹o chåi)
G§ T¸i sinh chåi G§ CÊy khëi ®éng
G§ t¹o rÔ cho chåi
G§ nh©n nhanh chåi
HuÊn luyÖn trong nhµ kÝnh
C©y mÇm
C©y gièng ®em trång
C©y con ë vên ¬m rõng
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
6. Nh÷ng vÊn ®Ò n¶y sinh trong nh©n gièng in vitro.
6.1. Sù nhiÔm mÉu.
- Trong qu¸ tr×nh nh©n gièng mÉu cã thÓ bÞ nhiÔm nÊm hoÆc virus
=> do ®ã ph¸ huû m«i trêng (¨n hÕt m«i trêng dinh dìng) =>
khi mÉu cÊy phôc håi th× m«i trêng dinh dìng ®· bÞ ph¸ =>
mÉu cÊy kh«ng sinh trëng vµ ph¸t triÓn ®îc.
- Kh¾c phôc:
+ Thay ®æi chÕ ®é khö trïng (dung dÞch khö trïng vµ thêi gian
khö trïng)
+ Sö dông m« ph©n sinh ®Ó lµm mÉu cÊy (v× m« ph©n sinh lµ
phÇn c¬ thÓ míi h×nh thµnh nªn cha bÞ nhiÔm nÉm hay virus).
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
6.2. S¶n sinh chÊt ®éc tõ mÉu cÊy.
- MÉu cÊy cã thÓ bÞ ho¸ n©u, ho¸ ®en råi chÕt. Do
trong mÉu cÊy chøa nhiÒu tanin (chÊt ch¸t)
- Kh¾c phôc: dïng mÉu cÊy cßn non ®Ó cÊy, bæ
sung vµo m«i trêng ho¸ häc than ho¹t tÝnh
(hót c¸c chÊt ®éc ra khái mÉu cÊy).
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
6.3. HiÖn tîng thuû tinh hãa.
- Trong trêng hîp c©y m« trë nªn mäng níc, cã th©n vµ l¸
trong suèt => kh«ng quang hîp ®îc => c©y chÕt.
- Kh¾c phôc:
+ T¨ng nång ®é ®êng trong m«i trêng ho¸ häc (do cã hiÖn
tîng thÈm thÊu nån ®é ®êng cao sÏ hót níc ra khái tÕ
bµo).
+ T¨ng cêng ®é ¸nh s¸ng, gi¶m nhiÖt ®é trong phßng nu«i.
+ Gi¶m nång ®é chÊt chøa nit¬ trong m«i trêng ho¸ häc.
- Ch¬ng VII. Nh©n gièng b»ng ph¬ng
ph¸p nu«i cÊy m« vµ tÕ bµo
6.4. TÝnh bÊt ®Þnh vÒ di truyÒn.
- NÕu tiÕn hµnh cÊy chuyÓn mÉu (chØ trong trêng hîp
m« sÑo) qua nhiÒu thÕ hÖ th× cµng ë nh÷ng thÕ hÖ sau
ë mÉu cÊy cµng xuÊt hiÖn ®ét biÕn soma víi tÇn sè
cao. Nguyªn nh©n lµ do tÕ bµo m« sÑo cã tr¹ng th¸i
gièng tÕ bµo ph«i sinh nªn rÊt trÎ => khi ®îc chuyÒn
qua nhiÒu thÕ hÖ th× bé gen cña chóng dÔ dµng thay
®æi.
- Kh¾c phôc: kh«ng cÊy chuyÓn mÉu qua nhiÒu thÓ hÖ
(kh«ng nh©n m« sÑo qua nhiÒu thÓ hÖ).
nguon tai.lieu . vn
