Bài báo cáo thực hành: Vi sinh đại cương

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH KHOA NGOẠI NGỮ­ SƯ PHẠM BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔN VI SINH ĐẠI CƯỚNG Thành viên nhóm: (lớp DH14SP,nhóm C5­S7) 1. Trần Hoàng Nam 2. Nguyễn Thị Thanh Vân 3. Phạm Thị Huỳnh Như 14132048 14132107 14132205 4. Nguyễn Mạch Trúc Vy 14132265 BÀI 1 1. Phương pháp khử trùng A.Mục đích: Làm chết hoàn toàn mọi mầm mống vi sinh vật, kể cả các vi sinh vật có bào tử. Đây là khâu quan trọng nhất. Khi nghiên cứu vi sinh vật, cần thiết phải khử trùng môi trường, dụng cụ, thiết bị để tránh sự phát triển lẫn lộn các hệ vi sinh vật ngoại lai vào giống vi sinh vật đang nghiên cứu. B.Các phương pháp khử trùng: Phương pháp vật lí: o Nhiệt khô: Tủ sấy ( 1800C/30phút, hay 1600C/ 2 giờ) ; đèn cồn. o Nhiệt ướt: Nồi hấp Autoclave ( 1210C/15­20p ở 1 atm). Phương pháp hóa học: cồn (70), javel, chlorin. Màng lọc 2. Môi trường dinh dưỡng A.Nguyên tắc: Tùy theo mục đích khảo cứu mà ta điều chế loại môi trường cho hợp lí. B.Một số loại môi trường dinh dưỡng phổ biến: Môi trường phân lập: là loại môi trường chọn lọc dạng đặc dùng để tách rời các khuẩn lạc đơn dòng nhằm thu được những dòng thuần. Môi trường tăng sinh: là môi trường tăng sinh chọn lọc, có khả năng ức chế hoặc ngăn chặn sự phát triển của nhóm vi sinh vật, đồng thời cho phép sự phát triển của nhóm khác trong quần thể vi sinh vật được nuôi cấy. Môi trường đếm tế bào. Môi trường thử phản ứng sinh hóa:dùng để xác định một vài tính chất sinh hóa ở các dòng vi khuẩn đã được phân lập. Môi trường bán lỏng: dùng để khảo sát tính di động của vi khuẩn. 3. Phân lập giống thuần khiết A.Mục đích: Để nghiên cứu về hình thái, tính chất sinh lí, sinh hoá của vi sinh vật. B.Các phương pháp phân lập giống thuần khiết Cách 1: Lấy mẫu bệnh­> nghiền thành dịch­> đem đi tran Cách 2: Chia đáy hộp Petri làm 4 phần ­> khử trùng que cấy ­> cấy ria từ phần 1 sang phần 2, xoay hộp thach 900,cấy ria từ phần 2 sang phần 3, xoay hộp thạch 900, cấy ria từ phần 3 sang phần 4. Khi cấy xong ủ ở nhiệt độ 370C, đặt ngược hộp thạch đáy lên trên, nắp ở dưới. 4. Phương pháp cấy chuyền vi sinh vật A.Mục đích: Bảo tồn vi khuẩn nuôi tinh khiết Li trích vi khuẩn có trong nước, mẫu đất, mẫu thực phẩm, mẫu bệnh lí. B.Phương pháp cấy: Lau bàn và rửa tay, khử trùng bằng cồn Tay phải cầm que cấy (như cầm bút), khử trùng que cấy và một phần của cán (phần đưa vào ống nghiệm) Tay trái cầm ống nghiệm có chứa vi khuẩn xuôi theo lòng ống bàn tay, tay phải lấy ngón út kẹp nút bông lôi ra, khử trùng miệng ống nghiệm Cho dây cấy đã khử trùng ( đã nguội) vào nơi có vi khuẩn, khử trùng miệng ống nghiệm và đậy nút bông lại. Thực hiện phương pháp cấy qua môi trường mới, khi cấy xong khử trùng lại que cấy trước khi bỏ xuống giá ống nghiệm. BÀI 2 1. Cách sử dụng kính hiển vi A.Cách điều chỉnh ánh sáng Mục đích: Làm cho tiêu bản được chiếu sáng thích hợp nhất *Lưu ý: o Khi quan sát bằng kính hiển vi để có ánh sáng thích hợp nhất ta chỉnh nút ánh sáng có trong kính. B.Cách chỉnh thấy rõ ảnh: Bước 1: Dùng ốc chỉnh nhanh đưa ống kính lên cao, xoay vật kính định dùng vào trục giữa Bước 2: Đặt tiêu bản lên bàn kính và kẹp chặt lại. Điều chỉnh vùng định xem vào giữa. Nhỏ một dầu lên tiêu bản( để tránh hiện tượng ánh sáng qua lăng kính bị khúc xạ,tán sắc và tập trung nhiều ánh sáng rọi vào kính để làm rõ vật. Bước 3: Mắt không nhìn vào thị kính mà nghiêng đầu một bên nhìn vào vật kính, xoay ốc điều chỉnh nhanh để hạ vật kính 100x xuống, đưa gần sát tiêu bản( 0.12mm) , động tác này phải tiến hành từ từ, hết sức cẩn thận để khỏi vỡ tiêu bản hoặc vỡ vật kính Bước 4: Mắt nhìn vào thị kính, dùng ốc điều chỉnh nhanh từ từ đưa vật kính lên cho tới khi thấy ảnh của vật thì dừng lại và dùng ốc vi cấp điều chỉnh cho ảnh rõ nhất ... - tailieumienphi.vn