Xem mẫu
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
BỘ Y TẾ
TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI
LÊ THỊ LIÊN
XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CRINAMIDIN
TRONG THUỐC VÀ THỰC PHẨM BẢO VỆ
SỨC KHỎE BẰNG SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ
LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC
HÀ NỘI 2018
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
BỘ Y TẾ
TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI
LÊ THỊ LIÊN
XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CRINAMIDIN
TRONG THUỐC VÀ THỰC PHẨM BẢO VỆ
SỨC KHỎE BẰNG SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ
LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC
CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC – ĐỘC CHẤT
MÃ SỐ: 8720210
Người hướng dẫn khoa học: TS. Trần Nguyên Hà
PGS.TS. Lê Thị Hồng Hảo
HÀ NỘI 2018
LỜI CẢM ƠN
Trong thời gian thực hiện luận văn này, tôi đã rất may mắn khi nhận được sự
giúp đỡ tận tình của các thầy cô giáo, các chuyên gia, các nghiên cứu viên, các anh chị
kỹ thuật viên cùng tình cảm và sự khích lệ mà gia đình và bạn bè đã dành cho tôi.
Tôi xin được bày tỏ sự kính trọng và lòng biết ơn sâu sắc tới TS. Trần
Nguyên Hà và PGS.TS. Lê Thị Hồng Hảo đã giao đề tài, luôn tâm huyết và tận
tình hướng dẫn, chỉ bảo tôi trong suốt thời gian thực hiện và hoàn thành luận văn.
Tôi xin được gửi lời cảm ơn sâu sắc và chân thành tới TS. Trần Cao Sơn đã
cho tôi những lời khuyên quý báu, dành nhiều thời gian và tạo điều kiện tối đa giúp
đỡ tôi hoàn thành luận văn này.
Tôi xin chân thành cảm ơn ThS. Cao Công Khánh cùng các anh chị, các
bạn khoa Nghiên cứu thực phẩm, khoa Độc học & dị nguyên, khoa Chất lượng, phụ
gia và chất hỗ trợ chế biến thực phẩm – Viện kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực
phẩm Quốc gia đã tạo điều kiện và nhiệt tình giúp đỡ tôi trong thời gian thực hiện
luận văn.
Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám Hiệu, phòng Sau đại học, bộ
môn Hóa phân tích – trường Đại học Dược Hà Nội, cùng các thầy cô đã giảng dạy
và giúp đỡ tôi trong quá trình học tập tại trường.
Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình và bạn bè – những người đồng
hành không thể thiếu trong học tập và cuộc sống đã luôn động viên và khích lệ tôi
những ngày qua.
Tôi xin chân thành cảm ơn!
Hà Nội, ngày 28 tháng 03 năm 2018
Học viên
Lê Thị Liên
MỤC LỤC
DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT
DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU
DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ
ĐẶT VẤN ĐỀ ............................................................................................................ 1
PHẦN 1. TỔNG QUAN ............................................................................................ 3
1.1. Tổng quan về cây trinh nữ hoàng cung ......................................................... 3
1.1.1. Đặc điểm thực vật ......................................................................................... 3
1.1.2. Nguồn gốc và phân bố, bộ phận sử dụng ..................................................... 4
1.1.3. Thành phần hóa học của cây Crinum latifolium L. ...................................... 4
1.1.4. Tác dụng sinh học ......................................................................................... 5
1.2. Tổng quan về crinamidin ................................................................................ 5
1.3. Một số nghiên cứu xác định crinamidin ........................................................ 7
PHẦN 2. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .......................... 15
2.1. Đối tƣợng nghiên cứu .................................................................................... 15
2.2. Phƣơng tiện nghiên cứu ................................................................................ 15
2.2.1. Chất chuẩn .................................................................................................. 15
2.2.2. Hóa chất, dung môi ..................................................................................... 16
2.2.3. Thiết bị, dụng cụ ......................................................................................... 16
2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu .............................................................................. 17
2.3.1. Xây dựng phương pháp định lượng crinamidin trong thuốc và TPBVSK .. 17
2.3.2. Thẩm định phương pháp định lượng crinamidin bằng kỹ thuật GC-MS/MS .... 19
2.4. Ứng dụng phƣơng pháp để xác định hàm lƣợng crinamidin trong thuốc
và TPBVSK ........................................................................................................... 21
2.5. Phƣơng pháp xử lý số liệu ............................................................................. 21
PHẦN 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ..................................................................... 22
3.1. Xây dựng phƣơng pháp phân tích ............................................................... 22
3.1.1. Kết quả khảo sát các điều kiện tối ưu cho phương pháp định lượng
crinamidin bằng GC-MS/MS ................................................................................ 22
3.1.2. Kết quả khảo sát quá trình xử lý mẫu cho phương pháp định lượng
crinamidin bằng GC-MS/MS ................................................................................ 29
3.2. Thẩm định phƣơng pháp phân tích ............................................................. 39
3.2.1. Tính thích hợp của hệ thống ....................................................................... 39
3.2.2. Tính đặc hiệu, chọn lọc ............................................................................... 40
3.2.3. Khoảng tuyến tính ....................................................................................... 44
3.2.4. Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng .................................................... 45
3.2.5. Độ lặp lại .................................................................................................... 46
3.2.6. Độ thu hồi ................................................................................................... 48
3.3. So sánh phƣơng pháp xây dựng với phƣơng pháp tiêu chuẩn Dƣợc điển
Việt Nam IV .......................................................................................................... 52
3.3.2. So sánh về giới hạn phát hiện (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) của hai
phương pháp ......................................................................................................... 54
3.3.3. So sánh về hiệu suất của quy trình chiết trên nền mẫu lá TNHC của hai
phương pháp ......................................................................................................... 55
3.4. Kết quả xác định hàm lƣợng crinamidin trên một số mẫu thuốc và TPBVSK .. 57
PHẦN 4. BÀN LUẬN .............................................................................................. 61
4.1. Về phƣơng pháp chiết xuất crinamidin từ các chế phẩm chứa TNHC .... 61
4.2. Về xác định hàm lƣợng crinamidin bằng GC-MS/MS .............................. 61
4.3. Ứng dụng phƣơng pháp để xác định hàm lƣợng crinamidin trên mẫu thực ... 62
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ................................................................................ 64
Kết luận ................................................................................................................. 64
Kiến nghị ............................................................................................................... 65
TÀI LIỆU THAM KHẢO
nguon tai.lieu . vn
BỘ Y TẾ
TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI
LÊ THỊ LIÊN
XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CRINAMIDIN
TRONG THUỐC VÀ THỰC PHẨM BẢO VỆ
SỨC KHỎE BẰNG SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ
LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC
HÀ NỘI 2018
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
BỘ Y TẾ
TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI
LÊ THỊ LIÊN
XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG CRINAMIDIN
TRONG THUỐC VÀ THỰC PHẨM BẢO VỆ
SỨC KHỎE BẰNG SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ
LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC
CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC – ĐỘC CHẤT
MÃ SỐ: 8720210
Người hướng dẫn khoa học: TS. Trần Nguyên Hà
PGS.TS. Lê Thị Hồng Hảo
HÀ NỘI 2018
LỜI CẢM ƠN
Trong thời gian thực hiện luận văn này, tôi đã rất may mắn khi nhận được sự
giúp đỡ tận tình của các thầy cô giáo, các chuyên gia, các nghiên cứu viên, các anh chị
kỹ thuật viên cùng tình cảm và sự khích lệ mà gia đình và bạn bè đã dành cho tôi.
Tôi xin được bày tỏ sự kính trọng và lòng biết ơn sâu sắc tới TS. Trần
Nguyên Hà và PGS.TS. Lê Thị Hồng Hảo đã giao đề tài, luôn tâm huyết và tận
tình hướng dẫn, chỉ bảo tôi trong suốt thời gian thực hiện và hoàn thành luận văn.
Tôi xin được gửi lời cảm ơn sâu sắc và chân thành tới TS. Trần Cao Sơn đã
cho tôi những lời khuyên quý báu, dành nhiều thời gian và tạo điều kiện tối đa giúp
đỡ tôi hoàn thành luận văn này.
Tôi xin chân thành cảm ơn ThS. Cao Công Khánh cùng các anh chị, các
bạn khoa Nghiên cứu thực phẩm, khoa Độc học & dị nguyên, khoa Chất lượng, phụ
gia và chất hỗ trợ chế biến thực phẩm – Viện kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực
phẩm Quốc gia đã tạo điều kiện và nhiệt tình giúp đỡ tôi trong thời gian thực hiện
luận văn.
Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám Hiệu, phòng Sau đại học, bộ
môn Hóa phân tích – trường Đại học Dược Hà Nội, cùng các thầy cô đã giảng dạy
và giúp đỡ tôi trong quá trình học tập tại trường.
Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình và bạn bè – những người đồng
hành không thể thiếu trong học tập và cuộc sống đã luôn động viên và khích lệ tôi
những ngày qua.
Tôi xin chân thành cảm ơn!
Hà Nội, ngày 28 tháng 03 năm 2018
Học viên
Lê Thị Liên
MỤC LỤC
DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT
DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU
DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ
ĐẶT VẤN ĐỀ ............................................................................................................ 1
PHẦN 1. TỔNG QUAN ............................................................................................ 3
1.1. Tổng quan về cây trinh nữ hoàng cung ......................................................... 3
1.1.1. Đặc điểm thực vật ......................................................................................... 3
1.1.2. Nguồn gốc và phân bố, bộ phận sử dụng ..................................................... 4
1.1.3. Thành phần hóa học của cây Crinum latifolium L. ...................................... 4
1.1.4. Tác dụng sinh học ......................................................................................... 5
1.2. Tổng quan về crinamidin ................................................................................ 5
1.3. Một số nghiên cứu xác định crinamidin ........................................................ 7
PHẦN 2. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .......................... 15
2.1. Đối tƣợng nghiên cứu .................................................................................... 15
2.2. Phƣơng tiện nghiên cứu ................................................................................ 15
2.2.1. Chất chuẩn .................................................................................................. 15
2.2.2. Hóa chất, dung môi ..................................................................................... 16
2.2.3. Thiết bị, dụng cụ ......................................................................................... 16
2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu .............................................................................. 17
2.3.1. Xây dựng phương pháp định lượng crinamidin trong thuốc và TPBVSK .. 17
2.3.2. Thẩm định phương pháp định lượng crinamidin bằng kỹ thuật GC-MS/MS .... 19
2.4. Ứng dụng phƣơng pháp để xác định hàm lƣợng crinamidin trong thuốc
và TPBVSK ........................................................................................................... 21
2.5. Phƣơng pháp xử lý số liệu ............................................................................. 21
PHẦN 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ..................................................................... 22
3.1. Xây dựng phƣơng pháp phân tích ............................................................... 22
3.1.1. Kết quả khảo sát các điều kiện tối ưu cho phương pháp định lượng
crinamidin bằng GC-MS/MS ................................................................................ 22
3.1.2. Kết quả khảo sát quá trình xử lý mẫu cho phương pháp định lượng
crinamidin bằng GC-MS/MS ................................................................................ 29
3.2. Thẩm định phƣơng pháp phân tích ............................................................. 39
3.2.1. Tính thích hợp của hệ thống ....................................................................... 39
3.2.2. Tính đặc hiệu, chọn lọc ............................................................................... 40
3.2.3. Khoảng tuyến tính ....................................................................................... 44
3.2.4. Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng .................................................... 45
3.2.5. Độ lặp lại .................................................................................................... 46
3.2.6. Độ thu hồi ................................................................................................... 48
3.3. So sánh phƣơng pháp xây dựng với phƣơng pháp tiêu chuẩn Dƣợc điển
Việt Nam IV .......................................................................................................... 52
3.3.2. So sánh về giới hạn phát hiện (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) của hai
phương pháp ......................................................................................................... 54
3.3.3. So sánh về hiệu suất của quy trình chiết trên nền mẫu lá TNHC của hai
phương pháp ......................................................................................................... 55
3.4. Kết quả xác định hàm lƣợng crinamidin trên một số mẫu thuốc và TPBVSK .. 57
PHẦN 4. BÀN LUẬN .............................................................................................. 61
4.1. Về phƣơng pháp chiết xuất crinamidin từ các chế phẩm chứa TNHC .... 61
4.2. Về xác định hàm lƣợng crinamidin bằng GC-MS/MS .............................. 61
4.3. Ứng dụng phƣơng pháp để xác định hàm lƣợng crinamidin trên mẫu thực ... 62
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ................................................................................ 64
Kết luận ................................................................................................................. 64
Kiến nghị ............................................................................................................... 65
TÀI LIỆU THAM KHẢO