- Trang Chủ
- Y khoa - Dược
- Đề tài: Nghiên cứu kỹ thuật bào chế, đánh giá khả năng kháng khuẩn trên in vitro của chế phẩm kem Silver sulfa 1% - Trần Văn Quang
Xem mẫu
- TrÇn v¨n quang
nghiªn cøu kü thuËt bµo chÕ, ®¸nh gi¸
kh¶ n¨ng kh¸ng khuÈn trªn in vitro
cña chÕ phÈm kem Silver sulfa 1%
Ngêi híng dÉn :
TS. NguyÔn ThÞ Léc
- §Æt vÊn ®Ò
Báng lµ mét bÖnh ngo¹i khoa kh¸ quan träng
§Ó ®iÒu trÞ báng c¸c chÕ phÈm cña sulfadiazin b¹c cã
nhiÒu u ®iÓm ®· ®îc chøng minh trong l©m sµng.
Viªc cung øng thuèc cã khã kh¨n.
C¸c môc tiªu cô thÓ cña khãa luËn :
1. Nghiªn cøu kü thuËt bµo chÕ kem Silver sulfa
1%.
2. Nghiªn cøu ®é gi¶i phãng ho¹t chÊt cña chÕ
phÈm.
3. Nghiªn cøu t¸c dông kh¸ng khuÈn trªn in vitro
cã so s¸nh víi víi chÕ phÈm Silvirin 1% (Ên §é).
- PhÇn I
Tæng quan tµi liÖu
1. Tû lÖ m¾c bÖnh báng.
Thêi b×nh : 1,8% - 10% so víi chÊn th¬ng ngo¹i khoa.
Trong chiÕn tranh : 3% - 10% tæng sè th¬ng binh vµ cã thÓ
lªn tíi 70% - 85%.
2. Thuèc mì s¸t khuÈn ®iÒu trÞ vÕt báng
t¹i chç
* Kem maduxin;* Mì cao vµng;* Damcream .
* ChÕ phÈm chøa ho¹t chÊt sulfadiazin b¹c nh :
Sivadene (Mü), Flammazin (Ph¸p), Silvirin (Ên §é),
Slivin (Pakistan)…
- 3. chÕ phÈm thuèc mì cã ho¹t
chÊt sulfadiazin b¹c.
3.1. C«ng thøc ho¸ häc.
Sulfadiazin b¹c lµ muèi b¹c cña N1- pyrimidin -
2 - yl - sulfanilamid (AgC10H9N4O2S)
KLPT = 357,1.
§é hoµ tan trong níc < 1/10.000.
- O N(6)
H2N S N(1)
N(2)
O(2)
Ag
H×nh 1 : C«ng thøc ho¸ häc cña sulfadiazin b¹c
- 3.2 C¬ chÕ t¸c dông.
* sulfadiazin cã t¸c dông k×m khuÈn: do
c¹nh tranh øc chÕ víi PABA.
* Ion b¹c:
Ion b¹c chuyÓn cÇu nèi gi÷a 2 nit¬ thuéc 2 nh©n
purin ®èi diÖn .Do vËy ®· lµm mÊt kh¶ n¨ng
sinh s¶n ph©n ®«i cña vi khuÈn.
Phèi hîp: nh©n pyrimidin sÏ dÔ dµng lµm vËn
chuyÓn ion b¹c qua mµng vi khuÈn.
* C¬ chÕ t¸c dông kh¸c víi c¸c hîp chÊt b¹c
kh¸c, kh¸c víi sulfadiazin ®¬n ®éc.
- 3.3. T¸c dông kh¸ng khuÈn.
B¶ng 1: Kh¶ n¨ng kh¸ng khuÈn trªn invitro
cña sulfadiazin b¹c
Nång ®é sulfadiazin b¹c
Hä vµ loµi
50 g/ml 100 g/ml
Ps. Aeruginosa 130/130 130/130
E. cloacae 24/24 24/24
Klebsiella pneumoniae 53/54 54/54
Escherichia coli 63/63 63/63
S. aureus 100/101 101/101
S. epidermidis 51/51 51/51
Enterococus (nhãm D) 52/53 52/53
Candia albicans 43/50 50/50
- 3.4. HÊp thu thuèc.
* C¸c nghiªn cøu vÒ hÊp thu víi Ag111 cho thÊy hÇu hÕt
thuèc tÝch tô ë líp biÓu b× (cã t¸c dông t¹i chç).
Kho¶ng 10% lîng sulfadiazin b«i t¹i chç ®îc hÊp thu..
§Ó ®o sulfadiazin vµ c¸c chÊt chuyÓn ho¸ ®Æc hiÖu cÇn
dïng ph¬ng ph¸p HPLC.
* Lîng b¹c ®îc hÊp thu trong c¬ thÓ kho¶ng díi 1%. §o
b»ng quang phæ hÊp phô nguyªn tö.
3.5. Nh÷ng u ®iÓm trong ®iÒu trÞ l©m sµng.
- Cã phæ kh¸ng khuÈn réng
- Cã thÓ lµm mÒm m« báng ®«ng cøng.
- Kh«ng g©y ®au khi b«i.
- Kh«ng g©y rèi lo¹n ®iÖn gi¶i hay kiÒm toan.
- Kh«ng lµm bÈn y phôc hay v¶i tr¶i giêng.
- PhÇn II
VËt liÖu vµ ph¬ng ph¸p nghiªn cøu
1. VËt liÖu trang thiÕt bÞ.
1.1. VËt liÖu ho¸ chÊt.
- B¹c sulfadiazin ®¹t tiªu chuÈn USP 24.
- C¸c t¸ dîc cÇn thiÕt ®¹t tiªu chuÈn D§VN III.
- C¸c chÊt b¶o qu¶n, c¸c chÊt chèng «xy ho¸ ®¹t
tiªu chuÈn D§VN III.
- C¸c dung m«i dïng cho SKLM, HPLC-pp.
- Mµng nh©n t¹o cellophan.
- C¸c ho¸ chÊt kh¸c cÇn thiÕt.
- 1.2. Dông cô, trang thiÕt bÞ.
- C©n ph©n tÝch ®é chÝnh x¸c 0,1mg cña Trung Quèc .
- M¸y ly t©m cña NhËt B¶n.
- Tñ ®iÒu nhiÖt gi÷ ®îc nhiÖt ®é ë 400C, Trung Quèc
- B¶n máng Silicagel 60 F254 ,VKN cung cÊp.
- §Ìn huúnh quang soi ë bíc sãng 254 nm.
- Th¹ch Muller - Hinton.
- C¸c chñng vi khuÈn: S. aureus, P. aeruginosa, E. coli.
- Dông cô nghiªn cøu kh¶ n¨ng gi¶i phãng dîc chÊt ra
khái t¸ dîc thuèc mì.
- M¸y s¾c ký láng cao ¸p hiÖu n¨ng cao Shimadzu.
- C¸c dông cô cÇn thiÕt kh¸c trong phßng thÝ nghiÖm.
- 2. Ph¬ng ph¸p nghiªn cøu.
2.1. §Þnh tÝnh ho¹t chÊt .
*§Þnh tÝnh Sulfadiazin
- Theo D§VN I:Dïng ph¬ng ph¸p SKLM :
+ HÖ dung m«i triÓn khai : Methanol : NH4OH®Æc
= 100 : 1,5 .
+ThÓ tÝch chÊm 10l.
+ Soi ®Ìn huúnh quang ë bíc sãng 254nm.
+ Gi¸ trÞ Rf chuÈn : 6,4. 2.2.
*§Þnh lîng sulfadiazin b¹c trong kem.
Ph¬ng ph¸p ®o nitrit :
1 ml natri nitrit 35,71mg sunfadiazin b¹c.
- 2.3. C¸c bíc nghiªn cøu m« h×nh kem Silver sulfa 1%.
X©y dùng c¸c c«ng thøc bµo chÕ
NC s¬ bé ®é bÒn v÷ng Lo¹i bít CT
kÐm bÒn v÷ng
KiÓm tra ®é gi¶i phãng ho¹t chÊt Lo¹ibít CT cã ®é
trªn invitro gi¶i phãng kÐm
KiÓm tra ®é kh¸ng khuÈn
H×nh 4: C¸c bíc nghiªn cøu m« h×nh kem Sliver sulfa 1%
- 2.3.1 (Bíc 1): X©y dùng c¸c c«ng thøc bµo chÕ.
* X©y dùng c¸c c«ng thøc cèt t¸ dîc
+ Trong tÊt c¶ c¸c c«ng thøc sö dông chÊt b¶o qu¶n
lµ hçn hîp nipagin: nipason =95: 5.
+ C¸c t¸ dîc phèi hîp trong c«ng thøc ph¶i ®em l¹i
gi¸ trÞ HLB thÝch hîp (8 - 18)
HLB hçn hîp
HLBc = sum @ (f x HLBn)
HLB yªu cÇu
%A = [100 (X - HLBb)] / (HLBa - HLBb)
%B = 100 - %A.
- * Nghiªn cøu t×m chÊt chèng «xy ho¸
Ion b¹c trong c«ng thøc ho¹t chÊt rÊt dÔ bÞ «xy ho¸.
-Nghiªn cøu víi 4 chÊt chèng «xy ho¸ sau:
Natri sulfit ,natri bisulfit,natri metasulfit,hydro quinon.
- Hµm lîng : 0,05%; 0,10% vµ 0,15%.
- Thêi ®iÓm:
t0: ngay sau khi bµo chÕ t1 sau khi bµo chÕ 1 ngµy, t2
sau khi bµo chÕ 3 ngµy, t3 sau khi bµo chÕ 7 ngµy.
- Ph¬ng ph¸p ®¸nh gi¸ : xem xÐt sù thay ®æi mµu s¾c.
- ChuÈn bÞ t¸ dîc ChuÈn bÞ dîc chÊt
Lµm thuèc mì ®Æc
Phèi hîp t¸ dîc
KiÓm nghiÖm
b¸n thµnh phÈm
Lµm ®ång nhÊt
KiÓm nghiÖm
thµnh phÈm
§ãng lä, d¸n nh·n
H×nh 5: S¬ ®å quy tr×nh bµo chÕ kem Silver sulfa 1%
- 2.3.2. (Bíc 2): Nghiªn cøu s¬ bé ®é bÒn v÷ng.
- §iÒu kiÖn 1:
Ly t©m thuèc mì míi bµo chÕ trong vßng 5 phót víi
tèc ®é 600v/phót ë nhiÖt ®é 20 10C. Quan s¸t sù
ph©n líp cña thuèc mì.
- §iÒu kiÖn2:
§Æt thuèc mì ë 40 10C trong vßng 1 ngµy ®ªm.
Quan s¸t sù thay ®æi cña thuèc mì.
-Lùa chän ba c«ng thøc bÒn v÷ng nhÊt nghiªn cøu
®é gi¶i phãng ho¹t chÊt
- 2.3.3. (Bíc 3): Nghiªn cøu ®é gi¶i phãng ho¹t chÊt
qua mµng cellophan
*KhuÕch t¸n thuèc qua mµng:
- Ng¨n trªn : 3g thuèc mì
- M«i trêng khuÕch t¸n : 25ml dung dÞch NH4OH
2,5%
- Thêi gian t1, t2, t3, t4 ®· ®Þnh s½n.
* §Þnh tÝnh ho¹t chÊt gi¶i phãng: SKLM(D§VN I)®Ó
x¸c ®Þnh ®· cã ho¹t chÊt gi¶i phãng vµ x¸c ®Þnh t1.
*§Þnh lîng nång ®é : ph¬ng ph¸p HPLC.
- Víi mçi CT, ë 1 thêi ®iÓm t, khuÕch t¸n 5 mÉu ®Ó
tÝnh lîng ho¹t chÊt gi¶i phãng qua mµng b»ng ph¬ng
ph¸p HPLC.
- - X©y dùng ®êng chuÈn: b»ng ph¬ng ph¸p b×nh
ph¬ng tèi thiÓu.
- C¸c th«ng sè cña ph¬ng ph¸p HPLC:
+ Pha ®éng lµ mét hÖ dung m«i A: B = 28 : 72 víi
. Dung m«i A lµ hçn hîp : Acetolnitrile
cã H3PO4 (1/900).
. Dung m«i B lµ hçn hîp : Níc cÊt cã
H3PO4 (1/900).
+ ThÓ tÝch mÉu tiªm 50 l.
+ Tèc ®é dßng 1ml/phót.
+ Cét: RP18, Sopam (250 x 4,6mm,5m).
+ §o ë bíc sãng 266nm.
- 2.3.4. (Bíc 4): Nghiªn cøu ®é kh¸ng khuÈn.
Sö dông ph¬ng ph¸p khuÕch t¸n trªn gel th¹ch:
Th¹ch Muller - Hinton ®æ ®Üa ®êng kÝnh 9cm, ®ôc 2 lç
®èi xøng cã ®êng kÝnh 1cm, 1 lç cho Silver sulfa 1%
(c«ng thøc cã ®é gi¶i phãng ho¹t chÊt tèt nhÊt t×m ®îc ë
bíc 3), lç cßn l¹i cho thuèc ®èi chøng Silvirin 1%. Sö
dông 3 ®Üa th¹ch cho 3 chñng vi khuÈn. S. aureus; P.
aeruginosa; E. coli (theo quy ®Þnh cña D§VN).
C¸c chñng vi khuÈn thuÇn ®îc lµm thµnh hçn dÞch 108
VK/ml cÊy l¸ng trªn bÒ mÆt th¹ch, ®îi kh« mÆt th¹ch
cho thuèc vµo lç thö vµ lç chøng t¬ng øng. C¸c ®Üa th¹ch
®îc ñ 370C trong 24 giê.
§äc kÕt qu¶ b»ng c¸ch ®o ®êng kÝnh vßng v« khuÈn
xung quanh lç thö vµ lç chøng.
- PhÇn III
KÕt qu¶ vµ bµn luËn
1. KÕt qu¶ x©y dùng c«ng thøc bµo chÕ.
X©y dùng c«ng thøc:
CT 1:
Sulfadiazin b¹c 1,0g
Acid stearic 24,0g
Triethanolamin 1,0g
Glycerin 13,0g
ChÊt b¶o qu¶n 0,50g
Níc tinh khiÕt v® 100ml
nguon tai.lieu . vn