Xem mẫu
- Thí nghiệm trích ly DNA từ
đậu hạt
Chuẩn bị nguyên liệu:
Cho vào máy xay các nguyên liệu sau:
- Nguồn nguyên liệu tươi chứa DNA (khoảng 100 ml
hoặc nửa tách đậu hạt đã tách vỏ)
- Một ít muối ăn (< 1 ml hoặc 1/8 muỗng cà phê)
- Lượng nước đá lạnh gấp đôi lượng nguyên liệu (ở đây
dùng khoảng 200 ml hoặc 1 tách nước)
Xay tốc độ lớn trong 15 giây, máy xay sẽ tách các tế bào
ra.
Cách làm:
Sau khi có hỗn hợp nguyên liệu tế bào, tiến hành theo 3
bước sau:
1. Lọc dung dịch vừa xay, đo thể tích dịch và cho nước
tẩy theo tỷ lệ 1/6 dịch xay (khoảng 30 ml hoặc 2 muỗng
canh) và khuấy đều, để ổn định hỗn hợp trong khoảng 5-
10 phút. Sau đó, cho dung dịch vào đầy khoảng 1/3 ống
nghiệm hoặc cốc nhỏ. Bạn có thể thử dùng các loại nước
tẩy có sẵn.
- 2. Cho một ít enzyme vào mỗi ống nghiệm và khuấy đều
nhẹ nhàng, lưu ý không khuấy quá mạnh sẽ làm vỡ DNA
làm cho khó nhìn thấy phát hiện ra DNA.
Hãy sử dụng enzyme làm mềm thịt hoặc nước ép dứa hay
dung dịch làm sạch kính áp tròng.
3. Nghiêng ống nghiệm và từ từ cho dung dịch cồn tiêu
chuẩn vào (chứa 70-95% isopropyl or ethyl alcohol) hình
thành một lớp váng mỏng trên mặt dung dịch đậu. Cho
lượng cồn vào ống nghiệm vừa bằng lượng hỗn hợp đậu
trong ống nghiệm và DNA sẽ nổi lên đi vào pha rượu, có
thể dùng que để lấy DNA ra khỏi dung dịch.
Rượu nhẹ hơn nước nên sẽ nổi lên trên hình thành 2 pha
rượu – nước trong hỗn hợp, protein và chất dầu mỡ sẽ đi
vào pha nước nằm ở phía dưới đáy, còn DNA ở phía lớp
trên bề mặt pha rượu. Bạn sẽ thấy DNA là một phân tử
chuỗi dài quấn rối với nhau.
Bàn luận:
Ngoài ra, bạn có thể thử thí nghiệm với các nguồn nguyên
liệu khác nhau, bất kỳ nguyên liệu tươi nào cũng chứa
DNA và tiến hành so sánh các loại DNA.
Bạn cũng có thể sử dụng các loại xà phòng bột giặt. Hãy
so sánh xem xà phòng bột và nước tẩy xem loại nào cho
thí nghiệm tốt hơn? Hãy thử với dầu gội đầu hoặc dung
dịch xà phòng tắm xem thế nào?
- Hãy thử thay đổi các bước thí nghiệm trên hoặc bỏ không
làm bước thí nghiệm nào đó, bạn có thể thay đổi thành
phần nguyên liệu sử dụng và quan sát thí nghiệm xảy ra
như thế nào?
Hãy thử sử dụng những loại nguyên liệu khác mà bạn cho
rằng không chứa DNA?
Nếu không thấy DNA, trước tiên hãy quan sát thật kỹ lớp
rượu xem có bong bóng nổi lên hay không, vì DNA có thể
nằm trong bong bóng. Nếu không thấy nữa, hãy đảm bảo
nguồn nguyên liệu sử dụng chứa nhiều DNA như nho,
hoặc nếu hỗn hợp chứa nhiều nước hay mờ đục sẽ khiến
khó quan sát, hãy dùng ít nước trong giai đoạn đầu thí
nghiệm. Một nguyên nhân khác nữa có thể do thời gian,
bảo đảm giai đoạn khuấy nước giặt ít nhất 5 phút, nếu
không tế bào vẫn dính vào màng hạt nhân sẽ lắng ở phần
đáy nước. Tương tự, để ổn định ống nghiệm chứa dung
dịch đậu và rượu khoảng 30-60 phút, DNA sẽ kết tủa ở
lớp rượu.
DNA là những chuỗi xoắn nằm trong tế bào, kể cả khi
trích ly, nó vẫn xoắn và kết bó với nhau.
Đây là hỗn hợp DNA và RNA, đây thực sự là quá trình
trích ly acid nucleic, tuy nhiên hầu hết RNA bị cắt mạch
bởi enzyme ribonucleases được hoạt hóa khi phá vỡ tế
bào.
- Nếu quan sát sản phẩm qua kính hiển vi thì chỉ thấy 1
chùm sợi DNA rối, do kích cỡ chiều rộng của 1 sợi DNA
rất nhỏ chỉ khoảng một phần tỷ mét, kể cả kính hiển vi
điện tử cũng không thể quan sát được, người ta dùng kỹ
thuật tinh thể học X-quang để chụp hình phân tử DNA
nguon tai.lieu . vn
