1. Trang Chủ
  2. Báo cáo khoa học
  3. Nghiên cứu đánh giá hiệu quả xử lý nước thải tinh bột mì bằng công nghệ lọc sinh học hiểu khí trên các loại vật liệu lọc khác nhau

Nghiên cứu đánh giá hiệu quả xử lý nước thải tinh bột mì bằng công nghệ lọc sinh học hiểu khí trên các loại vật liệu lọc khác nhau

Vào thap niên 90, các công nghe x$ lý nư c th i bang phương pháp sinh h'c hiêu khí thông thưng như: bùn hot tính [3] ñã ñưc nghiên cu và ng dng rong rãi. Tuy nhiên, phương pháp trên van còn mot sô nhưc ñiem như: t i tr'ng x$ lý chât hu cơ thâp (0,5 – 1 kgCOD/m3.ngày), de b sôc t i, hàm lưng sinh khôi dư cao cân chi phí x$ lý bùn. T 1980, nhiêu nghiên cu ñã bat ñâu tap trung vào các công nghe x$ lý nư c th i m i như Bio - 2 - sludge, Anaerobic baffler reactor (ABR), membrane bioreacto

Thể loại Tài liệu miễn phí Báo cáo khoa học

Số trang 9

Ngày tạo 8/30/2018 3:04:29 AM +00:00

Loại tệp PDF

Kích thước 0.16 M

Tên tệp

Tải Nghiên cứu đánh giá hiệu quả xử lý nước thải tinh ... (.pdf)

Xem mẫu

  1. Science & Technology Development, Vol 13, No.T3- 2010 NGHIÊN C U PHƯƠNG PHÁP TÁCH T BÀO GAN VÀ TH NGHI M HO T TÍNH B O V T BÀO GAN EX VIVO C A CAO CHI T CÂY RÂU MÈO Nguy n Ng c H ng(1), Võ Văn Giàu(1), Huỳnh Ng c Th y(2), Tr n Hùng(2), H Huỳnh Thùy Dương(3) (1) Trư ng Đ i h c Tôn Đ c Th ng; (2) Trư ng Đ i h c Y dư c TP.HCM (3) Trư ng Đ i h c Khoa h c T nhiên, ĐHQG-HCM (Bài nh n ngày 19 tháng 06 năm 2009, hoàn ch nh s a ch a ngày 01 tháng 11 năm 2010) TÓM T T: Cây Râu mèo (Orthosiphon aristatus Blume) là m t cây thu c ñư c s d ng r ng rãi trong y h c dân gian Vi t nam và nhi u nư c trên th gi i như là m t thu c l i ti u. Trong các nghiên c u trư c ñây c a chúng tôi ñã nh n th y tác d ng ch ng oxy hoá m nh c a cao chi t cây Râu mèo trên các mô hình th nghi m in vitro như ferric reducing/antioxidant power và 1,1-diphenyl-2-picryl- hydrazyl. Trong nghiên c u này, tác d ng b o v t bào gan ex vivo c a cao chi t Râu mèo ch ng l i tác d ng gây ñ c trên t bào gan c a carbon tetrachlorid (CCl4) trong mô hình gây t n thương t bào gan chu t tách r i ñư c th c hi n nh m ñánh giá m i tương quan gi a ñ c tính ch ng oxy hoá và tác d ng b o v gan c a Râu mèo. Mô hình ñư c s d ng là mô hình tách t bào c a Kiso có thay ñ i m t s bư c cho phù h p v i ñi u ki n hi n t i c a phòng thí nghi m. T bào ñơn sau khi tách ñư c ph c h i v i th i gian 2 gi trong môi trư ng E’MEM có b sung m t s ch t c n thi t cho t bào, sau ñó gây ñ c t bào b ng CCl4 1,5% trong th i gian 45 phút làm tăng cao ho t ñ c a enzym ALT trong môi trư ng. K t qu th nghi m cho th y cao chi t methanol cây Râu mèo các n ng ñ khác nhau ñ u có tác d ng h enzym gan, b o v t bào nhưng v i các m c ñ khác nhau. n ng ñ 0,1 và 0,25 mg/ml c a cao chi t methanol có kh năng làm gi m 60 % n ng ñ ALT so v i nhóm ch ng ñ c, ñưa n ng ñ ALT v còn 104 % so v i nhóm ch ng tr ng. T các k t qu thu ñư c, có th k t lu n là cao chi t methanol c a cây Râu mèo có tác d ng t t trong vi c b o v t bào gan ch ng l i tác d ng ñ c c a carbon tetrachlorid, có nhi u tri n v ng trong vi c s d ng phòng ng a các b nh v viêm gan c p tính. Keywords: Hepatocytes, Orthosiphon aristatus, CCl4, hepatoprotective effect 1. Đ T V N Đ bào gan s b hu ho i d n t i các t n thương Gan là m t cơ quan quan tr ng v m t trên gan d n d n d n t i các t n thương không chuy n hóa các ch t c a cơ th . M t trong h i ph c, xơ gan làm m t ch c năng gi i ñ c nh ng ch c năng r t quan tr ng c a gan là c a gan [5]. B nh gan là m t trong nh ng v n tham gia vào quá trình gi i ñ c các ch t n i ñ thư ng g p trong c ng ñ ng. Có nhi u lo i sinh và ngo i sinh. Trong các trư ng h p b nh b nh gan trong ñó thư ng g p là nh ng t n lý hay s quá t i các ch t ñ c trong gan, các t thương gan gây ra b nh viêm gan d n ñ n xơ Trang 58 B n quy n thu c ĐHQG-HCM
  2. T P CHÍ PHÁT TRI N KH&CN, T P 13, S T3 - 2010 gan và ung thư gan cu i cùng là gây t d ng b o v gan, trong nghiên c u này chúng vong v i nguyên nhân ch y u là do virút và tôi s d ng mô hình t bào gan tách r i gây nhi m ñ c. Ph n l n các ch t gây ñ c cho gan nhi m ñ c b i carbon tetrachlorid (CCl4) v i có liên quan t i s peroxid hóa lipid và các m t s nh ng thay ñ i cho phù h p v i ñi u stress oxy hóa [1]. ki n hi n t i c a phòng thí nghi m ñ ñánh giá Hi n nay, các th nghi m ch ng oxy hoá tác d ng b o v gan c a cao chi t methanol c a in vitro và các th nghi m trên t bào gan ex cây Râu mèo. vivo thư ng ñư c dùng ñ ñánh giá tác d ng 2. V T LI U VÀ PHƯƠNG PHÁP b o v gan c a các dư c li u, các cao chi t và 2.1. Hóa ch t phân ño n c a dư c li u. Các th nghi m này Collagenase (Type I) (Gibco), dimethyl có ưu ñi m là nhanh, k t qu l p l i, có th áp sulfoxide (DMSO) và trypan blue (Merck), d ng ñ sàng l c m t s lư ng m u l n trong Phosphate Buffered Saline (PBS) (Oxoid), th i gian ng n v i chi phí th p, s d ng m t albumin huy t thanh bò, môi trư ng Eagle's lư ng m u nh . Các th nghi m ex vivo có ưu minimal essential medium (E’MEM), huy t ñi m là g n v i h th ng sinh h c hơn nên thanh bào thai bò, dexamethasone, insulin thư ng ñư c dùng như nh ng th nghi m sàng (Sigma), kit th alanine aminotransferase l c trư c các th nghi m in vivo. Trong th (ALT) (Diagnosticum Zrt). Các hóa ch t khác nghi m trên các t bào gan tách r i, phương ñ t tiêu chu n phân tích. pháp c a Kiso ñư c s d ng vì có ưu ñi m là 2.2. V t li u nhanh và môi trư ng, hóa ch t ñơn gi n. Ph n trên m t ñ t c a cây Râu mèo ñư c Cây Râu mèo (Orthosiphon aristatus thu mua t i Th Đ c, Thành ph H Chí Minh Blume, h Hoa môi - Lamiaceae) là m t cây vào tháng 4 năm 2007. M u ñư c xác ñ nh thu c ñư c s d ng r ng rãi trong y h c dân b ng vi c kh o sát ñ c ñi m hình thái th c v t gian Vi t Nam và nhi u nư c trên th gi i như h c d a trên quan sát cây tươi. Dư c li u ñư c là m t thu c l i ti u, ñi u tr viêm th n, s i r a s ch, phơi trong bóng râm ñ n khô, xay th n, s i m t, tê th p, ñau nh c, b nh Goutte nh làm nguyên li u cho quá trình chi t thu [2, 8] và ñi u tr b nh ti u ñư ng [6]. Trong cao. các nghiên c u trư c ñây, chúng tôi ñã nh n th y tác d ng ch ng oxy hoá m nh c a cao Chu t nh t (ch ng Swiss albino) ñư c chi t methanol c a cây này trên các mô hình mua t Vi n Vaccin và Sinh ph m Nha Trang, th nghi m in vitro như ferric ñư c nuôi và th t i phòng thí nghi m Dư c lý, reducing/antioxidant power và 1,1-diphenyl-2- Khoa Dư c – ĐH Y Dư c TP. HCM. picryl-hydrazyl [7]. 2.3. Phương pháp nghiên c u Đ ñánh giá m i liên h gi a tác ñ ng Chu n b m u th : 50 g dư c li u ñư c ch ng oxy hoá c a cao chi t Râu mèo v i tác ngâm trong dichloromethan trong 24 ti ng, sau B n quy n thu c ĐHQG-HCM Trang 59
  3. Science & Technology Development, Vol 13, No.T3- 2010 ñó ñun h i lưu cách thu nhi t ñ 40oC trong enzyme ALT trên t t c các m u. Ch n th i 3 gi , l c nóng, chi t l p l i ñ n khi gi t d ch ñi m mà ho t l c enzyme cao nh t ñ làm thí chi t không ñ l i c n, g p các d ch chi t, thu nghi m. h i dung môi ñ thu cao dichloromethan. Bã Th nghi m sàng l c tác d ng làm h dư c li u ñư c lo i s ch dung môi và ti p t c enzym gan c a cao chi t Râu mèo trên mô hình ñư c chi t b ng cách ñun h i lưu cách th y v i t bào gan chu t nhi m ñ c CCl4: t bào gan dung môi methanol 60oC trong 3 gi , l c chu t sau khi tách ñư c ph c h i trong 2h nóng, chi t ki t, g p các d ch chi t, thu h i ñi u ki n nêu trên, sau ñó ti n hành gây ñ c t dung môi ñ thu ñư c cao methanol. bào b ng CCl4 và b sung các n ng ñ khác Tách t bào gan: theo phương pháp mô t nhau c a cao chi t Râu mèo (m u th ) vào t c a Kiso và c ng s (1983) [3] v i m t s bào ñ ki m tra ho t ñ enzym gan ALT. Ti n nh ng thay ñ i cho phù h p v i ñi u ki n hành song song các th nghi m là m u ch ng phòng thí nghi m. tr ng không gây ñ c và m u gây ñ c nhưng T bào ñơn sau khi tách ñáp ng ñư c m t không dùng thu c th nghi m ñ ñánh giá so ñ t bào t i thi u (>105 t bào/ml) s ñư c sánh k t qu . huy n phù trong môi trư ng E’MEM b sung Đánh giá k t qu : ño ho t tính c a enzym huy t thanh bào thai bò (10%), dexamethasone gan ALT theo phương pháp ño c a nhà s n (10-6M), insulin (10-8M), gentamycin (50 µg/L) xu t (Diagnosticum) phân b ñ u trong các ng ependorff 0,5 ml và 3. K T QU VÀ TH O LU N ñi u ki n 95% O2 và 5% CO2, 370C trong 2 3.1. Chu n hóa quy trình tách t bào gi ñ ph c h i sau quá trình tách. Ti n hành tách t bào gan chu t theo Kh o sát n ng ñ CCl4 và th i gian t phương pháp tách t bào gan chu t c a Kiso và bào thích h p c ng s [3], tuy nhiên vi c bơm r a gan b ng • Ti n hành thăm dò n ng ñ CCl4 t i thi u ñư ng tĩnh m ch ch trên không th c hi n có th dùng gây ñ c t bào, phóng thích enzyme ñư c và bơm r a gan b ng dung d ch có b gan ñ ñ kh o sát s thay ñ i c a enzyme trong sung collagenase cũng không th th c hi n do quá trình th nghi m. Pha CCl4 v i 1% DMSO và v n ñ kinh phí. Vì v y, chúng tôi ñã ti n hành nư c c t ñ có dãy n ng ñ CCl4 là 1,0%; 1,5% và thăm dò thay ñ i m t s bư c th c hi n cho 2,0%. Ch n n ng ñ CCl4 thích h p ñ s d ng phù h p v i ñi u ki n có ñư c trong phòng thí cho th nghi m. nghi m hi n t i và rút ra qui trình c th như • Thăm dò th i gian t bào v i CCl4 sau: thích h p, dò tìm th i ñi m ho t ñ enzym gan - Chu t sau khi ñ t ñ n tr ng lư ng yêu c u tăng cao nh t b ng cách ti n hành t bào (20 – 25g) s ñư c gây mê b ng ether. b ng trong th i gian 90 phút, trong th i gian , c ñư c m ra ñ b c l các cơ quan bên trong, các cơ m i 15 phút hút d ch nuôi c y ñi ño ho t l c Trang 60 B n quy n thu c ĐHQG-HCM
  4. T P CHÍ PHÁT TRI N KH&CN, T P 13, S T3 - 2010 quan c a h tiêu hóa như d dày, ru t ñư c kéo T bào ñơn sau khi ñư c tách, ti n hành sang m t bên ñ có th quan sát tĩnh m ch c a gan. xác ñ nh m t ñ t bào và t l s ng, ch t b ng Dùng ch lu n qua và c t c ñ nh tĩnh m ch ch cách nhu m t bào b ng trypan blue 0.4%. Sau phía trên ng c. C t tĩnh m ch ch dư i t i v trí khi nhu m t bào b ng trypan blue, ñ m t bào tĩnh m ch dư i th n ñ t o ñư ng thoát d ch cho ch t, ghi nh n t bào s ng trên bu ng ñ m vi c bơm r a gan. Đâm kim lu n vào trong tĩnh Neubauer. K t qu cho th y t bào gan sau khi m ch c a gan, dùng ch c t c ñ nh ng lu n v i ñư c tách v i t l s ng cao ñư c trình bày tĩnh m ch c a. Dùng PBS bơm vào ng lu n tĩnh trong b ng 1 m ch ñ r a gan. R a cho ñ n khi gan chuy n Huy n phù t bào trong môi trư ng nuôi sang màu vàng nh t ho c cho ñ n khi dung d ch E’MEM có b sung 10% huy t thanh bê, 10-7 PBS ch y ra t tĩnh m ch thân dư i không còn M insulin, 1% DMSO. t bào 2 gi trong t màu ñ . o t bào ñi u ki n 37 C, 5% CO2/95% O2. T - Gan sau khi ñư c r a s ñư c tách ra kh i bào tách ñư c s ti p t c ñư c s d ng nghiên cơ th chu t và ñư c gi trong dung d ch PBS có c u theo các hư ng khác nhau. ch a kháng sinh r i nhanh chóng chuy n vào t Vi c chu n hóa quá trình phân l p và tách c y vô trùng. T i ñây gan s ñư c r a l i b ng PBS t bào gan ñư c thay ñ i m t s bư c như sau: không có ch a kháng sinh. Gan ñư c ngâm ng p −B qua giai ño n truy n enzym trong dung d ch collagenase 0,075%, l c 100 collagenase vào bu ng gan thay vào ñó là o vòng/phút b ng máy l c trong 5 phút 37 C. Dùng ngâm h n bu ng gan trong m t th tích dung 2 k p m nh nhàng vu t t ng lá gan phân tán các d ch enzym Collagenase nh t ñ nh v i th i gian t bào (luôn luôn gi các lá gan chìm trong dung nh t ñ nh d ch collagenase 0,075%). K t qu ñ t ñư c sau − K t h p th i gian ngâm bu ng gan trong quá trình này là t o dung d ch huy n phù tr ng ñ c. dung d ch enzym và th i gian l c ti p xúc Dung d ch huy n phù ñư c này ñư c l c ti p 100 enzym v i bu ng gan, gi m th i gian tách t vòng/phút, trong 10 phút 37oC. C c ñ ng dung bào. d ch huy n phù ñư c ñ t l nh 15 phút. L c dung So sánh v i qui trình c a Kiso, qui trình d ch huy n phù qua g c-cotton vô trùng. Sau ñó này có nh ng ưu ñi m: thu l y d ch ch a t bào ñơn, ly tâm 1500 − Do b qua giai ño n truy n collagenase vòng/phút trong 15 phút 37oC. Thu l y c n t liên t c vào bu ng gan, ti n hành ngâm th ng bào. R a c n t bào b ng d ng d ch PBS không có gan vào dung d ch enzym collagenase nên gi m ch a kháng sinh ñ lo i b collagenase. Ly tâm ñáng k lư ng collagenase s d ng, gi m ñáng 1500 vòng/phút trong 15 phút 37oC thu l y t k chi phí cho th nghi m và ñơn gi n hóa qui bào. Quá trình này l p l i t 3 – 5 l n n u còn h ng trình c u. (R a – l c – ly tâm) B n quy n thu c ĐHQG-HCM Trang 61
  5. Science & Technology Development, Vol 13, No.T3- 2010 − Th i gian th c hi n nhanh t 10-15 phút vi c ph i l p l i nhi u l n giai ño n r a gan, nên h n ch t l t bào gan b ch t. ñi u này d n ñ n t l t bào gan ch t cao, m t V i k t qu như trên, chúng tôi có th ñ t bào s ng th p. nh n ñ nh là k t qu tách t bào t t và n ñ nh. Nh n xét bư c r a gan r t quan tr ng. N u r a gan không k thì h ng c u còn nhi u d n ñ n B ng 1. K t qu tách t bào ñơn b ng enzyme collagenase type I M t ñ t bào S t bào s ng L n th c hi n T l (%) (t bào/ml) (t bào/ml) L n1 79,7.105 77,8.105 97,6 L n2 88,1.105 83,6.105 94,9 L n3 59,3.105 54,6.105 92,1 Trung bình 75,7.105 71,9.105 94,8 3.2. Kh o sát n ng ñ gây ñ c c a CCl4 K t qu kh o sát vi c s d ng các n ng ñ và th i gian thích h p CCl4 khác nhau (1,0; 1,5; 2,0%) và tìm th i CCl4 là m t ch t ñ c ñư c s d ng ph gian thích h p trong kho ng th i gian 90 phút bi n trong mô hình th nghi m gây t n thương ñư c trình bày trong hình 1. K t qu cho th y gan ex vivo và in vivo. Ch t này gây nên s xơ n ng ñ 1,0 và 1,5%, lư ng enzym gan ti t ra hóa gan và làm thay ñ i các ch s sinh hóa c a môi trư ng tăng theo th i gian t 15 phút gan v i các tri u ch ng tương t v i viêm gan ñ n 45 phút và gi m d n th i gian 75 phút và do virút c p tính [4, 9]. Khi t bào b t n 90 phút trong khi n ng ñ 2,0% CCl4, ho t thương các enzym transaminsase như ALT... ñ enzym gan tăng d n trong kho ng 15-30 ti t ra môi trư ng làm cho ho t ñ ALT ño phút và gi m d n trong kho ng 45-90 phút. ñư c trong môi trư ng tăng. Ngư i ta ti n hành Ho t ñ enzym gan ño ñư c cao nh t và n ño ho t l c các men này ñ ñánh giá m c ñ ñ nh nh t là n ng ñ CCl4 1,5% v i th i gian thương t n t bào gan. 45 phút. Trang 62 B n quy n thu c ĐHQG-HCM
  6. T P CHÍ PHÁT TRI N KH&CN, T P 13, S T3 - 2010 500 CCl4 1,0% 450 CCl4 1,5% Ho t ñ ALT (IU/L) 400 CCl4 2,0% 350 300 250 200 150 100 50 0 0 20 40 60 80 100 Th i gian CCl4 (phút) Hình 1. nh hư ng c a n ng ñ CCl4 và th i gian ñ n s thay ñ i enzym gan c a môi trư ng nuôi t bào V i k t qu trên, ch n n ng ñ gây ñ c 3.3. Kh o sát tác d ng h enzyme gan c a CCl4 là 1,5% và th i gian gây ñ c t bào là trên mô hình t bào gan chu t b nhi m ñ c 45 phút làm thông s ñ th c hi n thí nghi m CCl4 c a cao chi t cây Râu mèo sàng l c tác d ng b o v gan ex vivo. Tác d ng b o v gan c a cao methanol cây Râu mèo ñư c trình bày trong hình 2. 250 200 Ho t ñ ALT (U/L) 150 100 50 0 1 2 3 4 5 6 Nhóm Hình 2. Ho t tính b o v gan exvivo c a cao chi t cây Râu mèo các n ng ñ khác nhau ch ng l i ch t ñ c CCl4 gây ñ c cho gan thông qua ho t ñ ALT ño ñư c trong môi trư ng Nhóm 1: nhóm ch ng tr ng (t bào chưa b nhi m ñ c); Nhóm 2: M u ñ c (t bào b gây ñ c b i CCl4); Nhóm 3, 4, 5, 6: nhóm th nghi m có dùng thu c sau khi gây ñ c. Các nhóm th nghi m 3, 4, 5, 6 th t các n ng ñ 0,05; 0,1; 0,25 và 0,5 mg/ml B n quy n thu c ĐHQG-HCM Trang 63
  7. Science & Technology Development, Vol 13, No.T3- 2010 Nhóm ñ c cho k t qu ho t ñ enzym gan nghi m l p l i ñ u cho k t qu tương t , chúng tăng 264 % so v i nhóm ch ng tr ng (t bào tôi nh n ñ nh có th do t bào ít nhi u b trư c khi CCl4) khi t bào gan n ng ñ thương t n, và do th i gian th nghi m quá 1,5% CCl4 trong kho ng th i gian 45 phút. K t ng n (ch trong vòng 45 phút) nên các thương qu cho th y nhóm th các n ng ñ khác t n t bào do quá trình r a tách chưa h i ph c nhau c a cao chi t cây Râu mèo (0,05; 0,1; hoàn toàn. Đ k t qu t t hơn nên kéo dài th i 0,25 và 0,5 mg/ml) ñ u có tác d ng làm h gian h i ph c c a t bào sau khi tách và nuôi enzym gan, b o v gan. Tuy nhiên, nhóm th c y r i m i ñưa vào th nghi m. 6 (có n ng ñ 0,5 mg/ml) cho k t qu h 4. K T LU N enzym gan y u nh t v i ho t ñ enzym gan là Đã ñ ngh ñư c m t s bư c chu n hóa 156 ± 9 U/L ch gi m 23% so v i nhóm ch ng qui trình tách t bào gan ñ th nghi m sàng ñ c. n ng ñ 0,1 và 0,25 mg/ml c a cao l c b o v t bào gan ex vivo, t bào gan thu chi t Râu mèo (nhóm 4, 5) ñ u cho tác d ng h ñư c có th ñư c dùng cho các nghiên c u enzym gan m nh nh t, v i ho t ñ l n lư t là khác như nuôi c y t bào gan và sàng l c sinh 80 ± 12 U/L và 81 ± 7 U/L gi m kho ng 60% h c cho các m u th nghi m. N ng ñ gây ñ c so v i nhóm ch ng ñ c, ñưa n ng ñ ALT v c a CCl4 là 1,5%; th i gian th nghi m 45’ còn 104% so v i nhóm ch ng tr ng. ñư c dùng làm thông s cho nghiên c u sàng T các k t qu thu ñư c trong th nghi m l c b o v gan c a các cao chi t, phân ño n này có th k t lu n là cây Râu mèo có tác d ng hay các ch t tinh khi t c a nghiên c u chúng h enzym gan theo k t qu th nghi m ex vivo. tôi. Qua ph n th nghi m ex vivo cho th y cao Cũng t k t qu này cho th y s tương quan methanol c a cây Râu mèo có tác d ng ch ng gi a ñ c tính ch ng oxy hóa m nh c a cao l i ch t ñ c, làm h enzym gan, b o v t bào chi t methanol c a cây Râu mèo có vai trò gan có hi u qu . Như v y, cao methanol c a quan tr ng trong vi c b o v t bào ch ng l i cây Râu mèo s ñư c nghiên c u sâu hơn qua ch t ñ c gây t n thương t bào. nghiên c u tác d ng b o v gan in vivo cũng Nh n xét nhóm ch ng tr ng ho t ñ như phân l p các ch t tinh khi t có tác d ng enzyme ñ u cao hơn m c bình thư ng, các th b o v gan trong phân ño n này. Trang 64 B n quy n thu c ĐHQG-HCM
  8. T P CHÍ PHÁT TRI N KH&CN, T P 13, S T3 - 2010 HEPATOCYTE ISOLATION AND EX VIVO HEPATOPROTECTION OF ORTHOSIPHON ARISTATUS EXTRACT ON CARBON TETRACHLORIDE INDUCED HEPATOTOXICITY Nguyen Ngoc Hong(1), Vo Van Giau(1), Huynh Ngoc Thuy(2), Tran Hung(2) Ho Huynh Thuy Duong(3) (1) Ton Duc Thang University (2)University of Medicine and Pharmacy-Ho Chi Minh City (3)University of Sciences, VNU-HCM ABSTRACT: Orthosiphon aristatus Blume, a member of the Lamiaceac family, is a medicinal herb known useful as a diuretic agent, used popularly in Vietnam and the nations in the world. In our previous research, it is found that O. aristatus had strong antioxidant in both methods of the ferric reducing/antioxidant power assay and the 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl free radical scavenging assay. The purpose of the present study was to examine the methanolic extract of O. aristatus with strong antioxidative activity against carbon tetrachloride (CCl4) induced cytotoxicity in isolated mouse hepatocytes using a modified procedure of Kiso. Suspension of isolated mouse hepatocytes incubated in E’MEM medium under a gas 95% O2 and 5% CO2, 37oC in 2h before the addition of 1.5% CCl4 and incubated in 45’. CCl4 administration significantly increased serum alanine aminotransferase (ALT) activity, a biochemical marker of hepatocyte injury in medium. Pretreatment with different concentration of methanolic extract of O. aristatus reduced ALT level. Methanolic extract with concentration of 0.1 và 0.25 mg/ml, were decreased ALT activity 60% compared to toxic group, remaining of the serum ALT was 104% compared to control group. The results of the present study showed that strong antioxidative activity of methanolic extract plays a crucial role in providing protection against such hepatocyte damage, and also supported the traditional believes on hepatoprotective effect of O. aristatus extract. Keywords: Hepatocytes, Orthosiphon aristatus, CCl4, hepatoprotective effect TÀI LI U THAM KH O [2]. J. Englert, G. Harnischfeger, Diuretic action of aqueous Orthosiphon extract in [1]. M.U. Dianzani, G. Muzia, M.E. Biocca, rats. Planta Medica 58, 237–238 (1992). R.A. Canuto, Lipid peroxidation in fatty [3]. Y. Kiso, M. Tohkin, H. Hikino, Assay liver induced by caffeine in rats. method for antihepatotoxic activity using International journal of tissue reactions carbon tetrachloride induced cytotoxicity 13, 79-85 (1991). in primary cultured hepatocytes. Planta B n quy n thu c ĐHQG-HCM Trang 65
  9. Science & Technology Development, Vol 13, No.T3- 2010 Medica 49(12), 222-225 (1983). reducing/antioxidant power and 1,1- [4]. V. Kumar, RS. Cotran, SL. Robbins, Cell diphenyl-2-picrylhydrazyl radical injury and adaptation; 5th ed. Bangalore. scavenging assays. 12th Asian Chemical India: Prime Books Publ, 3-24 (1992). Congress, Kuala Lumpur, Malaysia [5]. S. Shahani, Evaluation of hepatoprotective (2007). efficacy of APCL-A polyherbal [8]. Vi n Dư c li u, Cây thu c và ñ ng v t formulation in vivo in rats. Indian Drugs làm thu c Vi t Nam (t p 2) – NXB Khoa 36, 628-631 (1999). h c và k thu t (2004). [6]. K Sriplang, S. Adisakwattana, A. [9]. B. A. Vogels; O. T. Karlsen; M. A. Mass; Rungsipipat, S. Yibchok-Anun, Effects of W. M. Boveé; R. A. Chamuleau, L- Orthosiphon stamineus aqueous extract on ornithine vs. L-ornithine-L-aspartate as a plasma glucose concentration and lipid treatment for hyperammonemia-induced profile in normal and streptozotocin- encephalopathy in rats. Journal of induced diabetic rats. Journal hepatology 26 (1), 174-178 (1997). Ethnopharmacology 109(3), 510-514 (2007). [7]. Tran Hung, Nguyen Ngoc Hong, Ho Thi Cam Hoai, Ho Huynh Thuy Duong. Screening of some Vietnamese medicinal plants for antioxidant using ferric Trang 66 B n quy n thu c ĐHQG-HCM
nguon tai.lieu . vn
Thạc sĩ - Tiến sĩ - Cao học Công nghệ thông tin Kinh tế - Thương mại Tài chính - Ngân hàng Kiến trúc - Xây dựng Điện-Điện tử-Viễn thông Cơ khí - Chế tạo máy Công nghệ - Môi trường Báo cáo khoa học Quản trị kinh doanh Khoa học xã hội Khoa học tự nhiên Nông - Lâm - Ngư Y khoa - Dược