Xem mẫu

LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn các thầy giáo, cô giáo trong Khoa Sinh học tại trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội đã tận tình giảng dạy, đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi học tập và thực hành kỹ thuật thí nghiệm trong suốt quá trình học đại học và sau đại học tại trường. Để thực hiện và hoàn thành luận văn này tôi xin bày tỏ lòng biết ơn TS. Trần Quang Bình đã hướng dẫn nghiên cứu, tạo điều kiện thuận lợi và động viên tôi trong thời gian nghiên cứu và làm thí nghiệm tại Phòng thí nghiệm Di truyền Phân tử, Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương. Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn chân thành tới các anh, chị và các bạn làm việc tại Phòng thí nghiệm Di truyền Phân tử đã cùng chia sẻ kinh nghiệm, kiến thức và giúp đỡ tôi trong quá trình học tập và thực hiện luận văn tại phòng. Có được kết quả như ngày hôm nay tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới cha mẹ đã sinh thành và nuôi dưỡng. Xin cám ơn những người thân trong gia đình và bạn bè, những người đã luôn bên cạnh khích lệ động viên, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu. Hà Nội, ngày 27 tháng 4 năm 2013 Học viên Hà Thị Liên MỤC LỤC DANH MỤC CÁC HÌNH VÀ BIỂU ĐỒ....................................................iii DANH MỤC CÁC BẢNG..........................................................................iv CÁC CHỮ VIẾT TẮT.................................................................................v ĐẶT VẤN ĐỀ.................................................................................... 1 CHƢƠNG I. TỔNG QUAN TÀI LIỆU.............................................. 3 1.1. TỔNG QUAN VỀ BỆNH ĐÁI THÁO ĐƢỜNG...................................3 1.1.1. Lƣợc sử nghiên cứu và thuật ngữ đái tháo đƣờng...............................3 1.1.2. Đặc điểm dịch tễ học của bệnh đái tháo đƣờng...................................4 1.1.3. Phân loại bệnh đái tháo đƣờng............................................................7 1.1.4. Các yếu tố nguy cơ của bệnh đái tháo đƣờng týp 2.............................8 1.1.5. Cơ chế bệnh sinh của đái tháo đƣờng týp 2 ......................................12 1.1.6. Chẩn đoán bệnh đái tháo đƣờng .......................................................13 1.2. TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU VỀ GEN FTO ....................................16 1.2.1. Các gen có liên quan đến bệnh đái tháo đƣờng týp 2........................16 1.2.2. Lƣợc sử nghiên cứu về gen FTO ......................................................17 1.2.3. Vị trí và cấu trúc của gen FTO .........................................................19 1.2.4. Protein FTO......................................................................................20 1.2.5. Sự điều hòa và biểu hiện của gen FTO .............................................22 1.2.6. Chức năng của FTO .........................................................................23 1.2.7. Nghiên cứu gen Fto ở chuột và thiếu hụt chức năng gen FTO ở ngƣời ...................................................................................................................28 1.2.8. Sự liên quan của gen FTO với bệnh đái tháo đƣờng týp 2 ................30 CHƢƠNG II. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.............................. 35 2.1. ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU.............................................................35 2.2. HOÁ CHẤT VÀ TRANG THIẾT BỊ..................................................36 2.2.1. Hóa chất...........................................................................................36 2.2.2. Trang thiết bị....................................................................................36 i 2.3. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU........................................................37 2.3.1. Thiết kế nghiên cứu..........................................................................37 2.3.2. Các phƣơng pháp thu thập thông tin.................................................37 2.3.3. Các phƣơng pháp sinh học phân tử...................................................38 2.3.4. Phƣơng pháp phân tích thống kê.......................................................42 2.3.5. Đạo đức trong nghiên cứu ................................................................43 CHƢƠNG III. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU....................................... 44 3.1 Kết quả xác định kiểu gen bằng phƣơng pháp AS-PCR........................44 3.2. Kết quả xác định kiểu gen bằng phƣơng pháp RFLP-PCR...................44 3.3. Đặc điểm đối tƣợng nghiên cứu...........................................................45 3.4. Kết quả xác định kiểu gen ...................................................................46 3.5. Phân tích đặc điểm của đối tƣợng nghiên cứu theo kiểu gen ở nhóm bệnh và nhóm chứng ..................................................................................48 3.6. Phân tích ảnh hƣởng của gen FTO tại SNP rs9939609 đối với nguy cơ mắc bệnh đái tháo đƣờng týp 2...................................................................50 3.7. Phân tích ảnh hƣởng của gen FTO tại SNP rs9939609 cùng các yếu tố xã hội, lối sống đối với nguy cơ mắc đái tháo đƣờng týp 2.........................52 CHƢƠNG IV. BÀN LUẬN ............................................................. 54 4.1. Ảnh hƣởng của gen FTO tại SNP rs9939609 đối với bệnh đái tháo đƣờng týp 2 ở cộng đồng ngƣời Việt so với một số cộng đồng trên thế giới. ...................................................................................................................54 4.2. Tần số alen và sự phân bố kiểu gen của SNP rs9939609......................56 4.3. Cơ chế ảnh hƣởng của gen FTO và SNP rs9939609 đối với bệnh đái tháo đƣờng týp 2 ........................................................................................58 4.4. Thiết kế và phƣơng pháp nghiên cứu...................................................59 4.5. Một số hạn chế của nghiên cứu............................................................60 KẾT LUẬN...................................................................................... 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO ................................................................ 62 ii DANH MỤC CÁC HÌNH VÀ BIỂU ĐỒ Hình 1.1. Thống kê và dự đoán số ngƣời mắc đái tháo đƣờng týp 2 trên thế giới từ năm 2010 đến 2030.............................................................................................................5 Hình 1.2. Các gen liên quan tới bệnh đái tháo đƣờng týp 2 ........................................17 Hình 1.3. Các gen đột biến Ft ở chuột........................................................................19 Hình 1.4. Vị trí và cấu trúc gen FTO trên nhiễm sắc thể 16........................................19 Hình 1.5. Mô hình protein FTO .................................................................................20 Hình 1.6. Vị trí bám của CUTL1 trên gen FTO..........................................................23 Hình 1.7. Hoạt tính hóa sinh của FTO........................................................................24 Hình 1.8. Chức năng sinh lý của FTO........................................................................26 Hình 1.9. Ảnh hƣởng của FTO tới hành vi ăn uống....................................................26 Hình 1.10. Cụm SNP tại intron 1 của gen FTO liên quan với đái tháo đƣờng týp 2....31 Hình 1.11. Sự liên quan của SNP rs9939609 với bệnh đái tháo đƣờng týp 2 trong nghiên cứu tổng hợp ở Đông và Nam Á.....................................................................33 Hình 3.1. Kết quả xác định kiểu gen tại SNP rs9939609 trên gen FTO bằng phƣơng pháp AS-PCR …………………………………………………………………...……43 Hình 3.2. Kết quả xác định kiểu gen tại SNP rs9939609 trên gen FTO bằng phƣơng pháp RFLP-PCR………………………………………………………………………43 Biểu đồ 4.1. Tần số alen A và T của SNP rs9939609 ở một số cộng đồng..................57 Biểu đồ 4.2. Sự phân bố kiểu gen của SNP rs9939609 ở một số cộng đồng ...............58 iii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1. Đặc điểm nhân trắc của đối tƣợng nghiên cứu............................................45 Bảng 3.2. Phân bố kiểu gen và tần số alen của gen FTO tại SNP rs9939609..............46 Bảng 3.3. Đặc điểm đối tƣợng nghiên cứu theo kiểu gen FTO tại SNP rs9939609 trong nhóm đái tháo đƣờng.................................................................................................48 Bảng 3.4. Đặc điểm của đối tƣợng theo kiểu gen FTO tại SNP rs9939609 trong nhóm bình thƣờng ...............................................................................................................49 Bảng 3.5. Các mô hình phân tích ảnh hƣởng của SNP rs9939609..............................51 Bảng 3.6. Ảnh hƣởng của SNP rs9939609 cùng các yếu tố liên quan béo phì tới bệnh đái tháo đƣờng...........................................................................................................52 iv ... - tailieumienphi.vn
nguon tai.lieu . vn